类型

血清

实验名称

抗核抗体,antinuclear antibody(ANA)

关联实验

自身抗体检测;

关联问题

实验理由

筛查自身免疫性疾病。

何时实验

出现自身免疫性疾病症状时。

患者准备

采样

采样原则

IIF法是检则ANA的最有效方法和“金标准”。其基本原理是以组织培养细胞(最常用的是Hep-2细胞)或动物器官的冷冻切片、匀浆涂片(如小鼠肝匀浆)作为反应底物(抗原片)，于其上滴加稀释的待测血清，如血清中有ANA存在，则可与细胞中的核抗原结构形成抗原抗体复合物。经充分洗涤除去未结合物后，再加荧光素(常用异硫氰酸荧光素)标记的抗人IgG(或抗人IgA，抗人IgM)抗体于抗原片上，形成核抗原-患者血清中的抗核抗体-荧光素标记的抗人Ig反应复合物，经充分洗涤后在荧光显微镜下观察。ANA与核抗原反应后可形成4种荧光图谱。 (1)均质型(homogeneous pattern)：核呈弥漫性荧光，核仁区不着色。一般认为是抗组蛋白抗体、抗双链DNA(抗ds-DNA)与相应核抗原结合所引起。 (2)周边型(peripheral pattern)：由针对膜孔复合物和板层素(lamins)的抗核抗体引起；陈永铭(Eng Ming Tan)未介绍此型荧光图谱；20世纪80年代的一些文献普遍认为，周边型荧光主要由抗ds-DNA和较少由抗单链DNA(抗ss-DNA)、抗组蛋白抗体与相应核抗原结合引起，是围绕着分裂间期的核膜形成环状的荧光，而核的中心部位荧光相对较暗。有人认为，高浓度的抗组蛋白、抗 ds-DNA抗体形成均质型荧光，而较低浓度的抗体则形成周边型荧光。 (3)斑点型(speckled pattern)：核内出现大小一致的或大小不等的荧光斑点，由抗Sm、抗U1 RNP、抗Scl-70以及抗La/SS-B与相应核抗原结合引起。 (4)核仁型(nucleolar pattern)：仅核仁着染荧光，表现为均质的、周边的或斑点状荧光。多由抗RNA聚合酶-1，抗NOR-90、抗PM-Scl抗原复合物(20～110kD的多种蛋白组成)、抗原纤维蛋白(U3RNP)等抗核抗体与相应核仁抗原结合引起。

正常值描述

间接免疫荧光法:阴性

疾病相关

干燥综合征; 混合性结缔组织病; 进行性全身性硬化症; 溃疡性结肠炎; 类风湿性关节炎; 桥本甲状腺炎; 全身性红斑狼疮; 重症肌无力

摘要

同荧光法检测。

说明

ANA试验可用于辅助筛查自身免疫性疾病，最常用于诊断SLE根据患者的症状和疑似诊断，可以单独检测也可与其它自身抗体联合检测。其它反映炎症的试验包括红细胞沉降率（ESR）和/或C反应蛋白（CRP）。完成ANA试验之后还可进行加做其他试验，结合患者病史以帮助排除其它自身免疫性疾病。ANA试验阳性可能提示自身免疫性疾病，但仍需进一步检查以确诊。某些没有自身免疫性疾病的人ANA也可以呈阳性，这种情况较少见，随着年纪增大，ANA假阳性几率也增大。同样，ANA可能在自身免疫性疾病症状体征出现前呈阳性，所以对于无症状的患者其ANA阳性结果需要时间来验证其意义。ANA大多数的阳性结果是没有临床意义的，因此医生应当宽慰患者不必过于紧张，但仍应注意以后是否有自身免疫性疾病相关症状体征出现。约95%的SLE患者ANA检查阳性，如果患者同时具有SLE症状如关节炎、红斑、自身免疫性疾病血小板减少，那么其极可能罹患了SLE。在上述病例中，ANA结果对于SLE的诊断就很有帮助。可以进一步检测如抗双链DNA抗体、抗平滑肌抗体等特殊抗体以确证SLE。阳性ANA同样可见于药物性狼疮，这种情况与抗组蛋白自身抗体有关，组蛋白是一种富含赖氨酸和蛋白氨酸水溶性蛋白质。必要时应进行抗组蛋白试验来确证药物性狼疮的诊断。ANA阳性还可见于干燥综合征、硬皮病、雷诺病、类风湿关节炎、皮肌炎、混合型结缔组织病及其他自身免疫性疾病患者。ANA阴性时通常不能诊断为SLE，一般也不必立即重复检测；但是，根据自身免疫性疾病的流行病学特征，定期复查ANA还是有价值的；一般而言，ANA阴性时也不用进一步检测自身抗体亚型。

结论有效原因

(1)用IIF法检测ANA，正确诊断的前提是对每份待测血清同时用Hep-2细胞和肝细胞做抗原片进行平行测定，选用何种细胞为抗原片，抗原片的固定方法，荧光抗体的特异性、效价、亲和力，荧光显微镜的质量等都对测定的结果有不容忽视的影响，因此，每个实验室都应进行严密的室内检验质量控制，每次试验都应设置阳性对照(WHO标准血清)和阴性对照血清。 (2)4种典型的荧光图谱其形成虽与某些特定的抗核抗体有关，但不能根据荧光谱型做出何种抗核抗体阳性的诊断。荧光谱型的意义只在于提示需要进一步做何种特异性抗核抗体的检查。