类型

血浆

实验名称

α2-纤溶酶抑制抗原,Tissue Plasminogen Activator Antigen

关联实验

关联问题

实验理由

何时实验

患者准备

采样

采样原则

本试验根据双抗体夹心法原理，即将纯化的t-PA单克隆抗体包被在固相载体上温育，然后加含有抗原的待测标本。标本中的t-PA抗原与固相载体上的抗体形成复合物。此复合物与过氧化物酶标记的t-PA单克隆抗体起抗原抗体结合反应，形成t-PA-POD复合物。后者可使邻苯二胺基质液呈棕色反应，其反应颜色深浅与标本中t-PA含量呈正比关系。

正常值描述

1～12ng/ml。

疾病相关

肥胖症; 冠心病; 血栓形成

摘要

(1)用0.05mol/L碳酸盐缓冲液稀释t-PA抗体。 (2)用稀释缓冲液稀释抗体-POD结合物。 (3)用基质缓冲液溶解邻苯二胺(8mg/ml)，并加入10μl 30% H2O2。 (4)将t-PA标准倍比稀释成10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125IU/ml。 (5)标本稀释：1份柠檬酸钠抗凝血浆加5份稀释液。如果估计t-PA值增高，血浆作1∶10稀释。 (6)用稀释之t-PA抗体包被ELISA反应板，每孔200μl，温育过夜，然后用洗涤液洗3次。 (7)加标准/标本200μl，温育1h后，同上洗涤3次。 (8)加过氧化物酶抗体复合物200μl，温育1h后，同上洗涤3次，洗后立即加基质。 (9)每孔加基质200μl，显色10～15min。 (10)加硫酸(3mol/L)50μl或盐酸(1mol/L)100μl，10min中止反应，于492nm，2h内比色，以稀释缓冲液为本底。 (11)据吸光度读数由标准曲线查得t-PA含量。

说明

(1)t-PA含量随年龄、剧烈运动和应激反应而增高，静脉滞留导致t-PA含量增加。 (2)先天性t-PA含量增高症。 (3)高血脂、肥胖症、口服避孕药、冠心病、心肌梗死、动脉血栓形成、缺血性中风等t-PA含量减低。

结论有效原因

ELISA法是一项特异性和敏感性较高的免疫学试验。因此必须严格控制每项试验的条件。