类型

血浆

实验名称

纤维蛋白肽A,fibrinopepide-A

关联实验

关联问题

实验理由

何时实验

患者准备

采样

采样原则

纯化的人FPA包被于固相，液相中的待测FPA竞争抑制抗人FPA与固相FPA的结合，再以酶标记的二抗检测结合于固相的抗人FPA的量，从标准曲线计算标本中FPA的含量。

正常值描述

1.2±0.8μg/L。

疾病相关

摘要

(1)血浆标本的采集：用塑料注射器顺利取静脉血4.5ml(开始的2ml弃去)，加入盛有0.5ml抗凝剂(肝素钠500u和aprotinin 5000u)的试管中，立即混匀。3000r/min离心20min，分离血浆，吸上层血浆至另一试管，立即作下一步处理或置－20℃保存。（2）血浆标本的皂土吸附处理：目的是彻底除去纤维蛋白原。40mg皂土加入45ml的聚丙烯塑料离心管中，加入0.5ml吸附缓冲液，充分混匀，加入1ml血浆，在回旋混合器上震荡混匀，再缓慢震摇10min。5000r/min离心15min，吸取上清液至另一试管，再如上法以皂土吸附处理1次。然后吸取上清液1ml加到一预先盛有20g/LTween20溶液50μl的试管中，混匀。最终标本已稀释20倍。 （3）FPA包被：取1μg/ml的FPA溶于包被缓冲液中，加入聚苯乙烯反应板，200μl/孔，加盖，37℃过夜。次日弃孔内液。以洗涤液洗板5次，每次3min，甩干，备用。 （4）FPA标准品：以标本稀释缓冲液配成；25，12.5，6.25，3.12，1.56，0.78ng/ml等6个不同浓度。分别吸取0.9ml于一系列小试管中，再在各管中加入0.1ml的工作浓度的兔抗人FPA。经皂土吸附处理的待测血浆标本作原倍、1∶2、1∶4倍3个浓度如上操作。上述各管置37℃反应3h。 （5）从温育后的上述各管中分别吸取200μl加入已包被的FPA的反应板各孔中，置板于37℃保温2h，洗板5次，甩干。（6）各孔加HRP-羊抗兔IgG（以标本稀释液稀释至工作浓度）200μl/孔，置板于37℃温育2h，洗板5次,甩干。（7）各孔加新鲜配制的底物液200μl，37℃避光精确反应3min，各孔立即滴加3mol/L H2SO4 50μl以终止反应。在酶标上测定各孔的A值（492nm）。

说明

血浆FPA含量增高反映凝血系统激活和凝血酶的生成。因此见于高凝状态和血栓性疾病，原发性和继发性纤溶的鉴别，抗凝治疗过程中的监测指标。

结论有效原因

(1)采血要顺利不应＞45s，且开头2ml弃去，注射器要硅化或用塑料注射器。 (2)采血后立即注入盛有抗凝剂的试管中，并在冰水中迅速混合，若需保存则以经皂土吸附处理后－20℃较妥。