类型

精液

实验名称

精子顶体酶

关联实验

关联问题

实验理由

何时实验

患者准备

采样

采样原则

在25℃ pH8.7条件下，采用ADH/NAD＋反应测定苯甲酰精氨酸乙酯(BAEE)的水解产物乙醇，乙醇又在乙醇脱氢酶(ADH)的催化作用下，将辅酶Ⅰ(NAD)还原为还原性辅酶Ⅰ(NADH)，根据NADH吸光度的变化值而得出顶体酶的水解活性。

正常值描述

(36.72±21.43)U/L(BAEE-ADH法)。

疾病相关

男性不育症

摘要

(1)精子的洗涤和顶体酶的提取：取0.25ml液化的精液于塑料离心管中，以500×g离心5min；弃上清，将离心管在吸水纸上倒置，以除去剩余溶液，再加0.25ml 2%的醋酸溶液，放4℃冰箱内抽提过夜(16～24h)，取出后以1000×g离心10min，取上清备用。 (2)测定过程：在比色杯内依次加入用pH8.7 0.05mol/L Tris-HCl缓冲液新鲜配制的NAD(1mg/ml)0.1ml，BAEE1mg/ml 0.5ml，ADH(3.46mg/ml)0.1ml和Tris-HCl缓冲液2.25ml，均匀混合后25℃下预温5min，再加入0.05ml顶体酶抽提液立即混合均匀，记录加入酶液后10min，反应液在366nm下吸光度的变化值(△A366mm/10min)。 (3)酶活力单位的定义和酶活力的计算：1个毫单位(mu)的顶体酶活力等于在上述反应条件下(pH8.5和25℃)，每分钟水解1nmol/L的BAEE所需要的顶体酶量。因为水解1nmol/L的BAEE使反应液的吸光度变化0.0011，所以每毫升精液内的酶活力按下列公式计算（图1）   t是反应时间(10min)，△A是在t分钟内吸光度的变化值，V是加入酶液的体积(0.05ml)，所以，酶活力（图2） 按以上公式得到的是每毫升抽提液内的酶活力，因为抽提液的体积和原始精液体积相同，所以，上述公式计算的就是每毫升精液内的顶体酶活力。

说明

顶体酶对于精子的运动和受精过程都是不可缺少的，顶体酶活力不足可导致男性不育。因此精子顶体酶活性测定可作为精子受精能力和诊断男性不育症的参考指标。

结论有效原因

顶体酶还能促进生殖系统中激肽的释放，从而增强精子的活力和促进精子的运动。顶体酶活力不足可导致男性不育。