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解脲脲原体
采样原则
聚合酶反应是在体外进行的由3个基本步骤组成的循环反应。第一步变性：将所有扩增的基因片段加热，使双链之间的氢键断裂，分解成两条单核苷酸链；第二步退火：当温度下降时，化学合成的寡聚核苷酸引物即与所要扩增基因两侧的DNA相合；第三步延伸：在合适缓冲液，即镁离子和4种脱氧核苷酸存在的条件下，DNA聚合酶能忠实地根据模板碱基序列合成互补链，从引物的3＇端进行延伸，合成的方向为5＇→3＇，从而合成与原来结构相同的基因片段2分子。3个步聚组成成1个循环，每循环1次DNA分子数按指数倍增。
疾病相关
不孕症; 非特异性尿道炎; 尿道炎; 新生儿化脓性脑膜炎; 新生儿脑膜炎; 早产
摘要
反应周期：①变性：90℃ 30～60s；②引物和模板的退火温度：40～60℃ 30～60s；③延伸：72℃ 1～2min。经反复循环30～40次，最后1次72℃引物延伸7min后终止。除去液体石蜡后，产物可供分析。经琼脂糖凝胶电泳后，用溴乙锭染色，经紫外灯照射可见预料扩增长度的荧光条带。产物也可与放射标记或非放射标记的寡聚核苷酸探针行Southern印迹杂交或点渍印迹杂交。如用PCR自动仪则更为方便，将反应试剂、DNA模板及Tap-DNA聚合酶加入试管后，放进已调好程序，即所需变性→退火→延伸各自的温度和时间及循环次数的自动仪中进行反应，即可获得满意的扩增产物。
说明
阳性：UU感染、非淋球菌尿道炎、不孕症、绒毛膜羊膜炎、子宫内膜炎、非特异性尿道炎(宫颈炎)、早产、流产、新生儿化脓性脑膜炎(新生儿脑膜炎)、尿路结石。
结论有效原因
由于PCR方法极为灵敏，因此稍有遗留PCR产物就可造成污染。避免污染的措施：①PCR反应前操作的地方和器材与反应后的应分开；②所用的试剂应分成若干份保存；③加样时，样品应最后加，并立即将管口盖妥；④吸管、试管尽量做到一次性使用。