类型

唾液

实验名称

唾液分泌型免疫球蛋白

关联实验

关联问题

实验理由

何时实验

患者准备

采样

采样原则

本法是标记抗原(Ag·)和非标记抗原(Ag)对特异性抗体(Ab)的竞争抑制反应，其反应为Ag·＋Ag＋Ab(Ag·Ab）＋（AgAb）。 当Ag·和Ab的量保持恒定，Ag与Ag·之和大于Ab上的有效结合点的数目，在该条件下，Ag与Ag·间存在着函数关系，亦即随着Ag浓度增加，Ag-Ab生成量多，而Ag·-Ab的数量则减少，游离的Ag·就增多。因为Ag·对Ab的结合，可因Ag竞争结合而遭抑制。反之，当Ag量少时，Ag-Ab生成量就少，Ag·-Ab量增多，而游离的Ag·减少（图1）。 将结合的抗原抗体复合物（B）与游离抗原（F）分离，分别测定B和F的放射活性，计算出B/F或B/B＋F值，可制出B/F或B/B＋p对Ag量的关系曲线图。测定时，需用一系列已知浓度的Ag和一定量Ag·及相应抗体Ab混合，然后测出各标准浓度Ag参加下的Ag·-Ab放射结合率（B/B＋F）或（B/F），绘出竞争抑制标准曲线（图2）。 试验时，在同样条件下，根据被测Ag的放射性结合率，从标准曲线上查知相应Ag含量。

正常值描述

唾液中免疫球蛋白含量参考值：成人 sIgA 132.8±70.2mg/L，sIgG 127.9±42.9mg/L；儿童3-5岁 sIgA 1.3-5.3mg/L，sIgG 4.0-7.6mg/L，sIgM 0-48mg/L；儿童6-10岁 sIgA 2.8-7.8mg/L，sIgG 7.6-11.2mg/L，sIgM 22-132.4mg/L；儿童11-15岁 sIgA 7.8-55.2mg/L，sIgG 7.6-11.2mg/L，sIgM 48.0-222.0mg/L。

疾病相关

麻疹; 龋齿

摘要

本法分三个步骤，即抗原与抗体反应、B和F分离和放射性测定。 (1)抗原与抗体反应：将标本(非标记抗原)、标记抗原和抗血清顺序定量加入小试管内，置室温(15～30℃)作用24h，使其充分竞争结合。 (2)B、F分离：分离技术多种多样，常用沉淀法。①第二抗体沉淀法：又称双抗体法，在受检抗原与第一抗体特异性反应后加入相应的第二抗体，使形成的抗原-第一抗体-第二抗体的复合物共沉，一经离心即可使结合标记抗原B与游离抗原F分离。本法是特异性沉淀，分离完全，非特异性结合力低。但第二抗体用量较大，成本较高。此外标本浓度、抗凝剂的有无因素可在一定程度上影响结果。②聚乙二醇(PEG)沉淀法：使蛋白质处于等电点状态，水化层破坏而导致蛋白质沉淀。本法优点是PEG制备方便、价廉、分离快速，缺点是非特异沉淀物较多，分离不完全。③第二抗体-聚乙二醇沉淀法：本法既有PEG法的快速沉淀优点，且保持第二抗体特异性沉淀的作用，又减少第二抗体用量，并降低PEG浓度，使非特异沉淀物减少。④活性炭吸附法：利用活性炭表面活性将小分子的游离部分吸附。如在活性炭表面涂上一层葡聚糖，使它表面具有一定孔径的网眼，从而允许小分子游离抗原或半抗原逸入而被吸附，而大分子复合物则被排斥在外。在抗原与抗体反应后，加入葡聚糖-活性炭，放置5～10min，使游离抗原吸附在活性炭颗粒上，离心使颗粒沉淀，上清液中含有结合的标记抗原。 (3)放射性强度测定：B和F分离后，即可测定其放射性强度。测量仪器有两类：液体闪烁计数仪(测β射线)和晶体闪烁计数仪(测γ射线)。计数单位是探测器输出的电脉冲数，单位为cpm(脉冲数/min)。 每次测定均需作一标准曲线图，以标准抗原的不同浓度为横坐标，以测到的相应放射性强度为纵坐标作图。放射性强度可任选B或F，亦可采用计算值B/B＋F、B/F或B/B0。标本应作双份测定，取其平均值，在标准曲线上查出相应的受检抗原浓度。

说明

儿童唾液的SIgA和SIgG含量明显低于成人，随年龄递增，16岁后接近成人水平。 (1)Ig增高：唾液腺的炎症、恶性肿瘤等可破坏血液-唾液屏障，使血液中的Ig进入唾液，使SIgA、SIgG、SIgM均可增高。某些病毒感染如麻疹早期，可从唾液中检出特异性SIgA型抗体，有助于诊断。sjogren综合征属自身免疫性疾病，主要侵犯外分泌腺，使唾液中SIgA增高。口腔局部炎症亦可增高。 (2)Ig减低：病理性唾液Ig减低见于原发性或继发性免疫缺乏病如先天性丙种球蛋白缺乏症、原发性选择性SIgA缺乏症、应用免疫抑制剂和放射治疗时，龋齿患儿及大量吸烟者SIgA也可降低。

结论有效原因

放射免疫测定具有灵敏度(可测定钠克甚至皮克水平)、特异性强(可分辨结构类似的抗原)和准确性好(钠克量的回收率接近100%)。