类型

泪液

实验名称

泪液乳酸脱氢酶,lactate dehydrogenase，LDH

关联实验

关联问题

实验理由

何时实验

患者准备

采样

采样原则

LDH以NAD＋作氢的受体，催化乳酸脱氢，生成丙酮酸，后者与2，4-二硝基苯肼作用，生成丙酮酸二硝基苯腙，在碱性溶液呈红色，根据颜色深浅求出酶活性。

正常值描述

LDH：        1.29～9.02U/L LDH同工酶：LDH1 0.66±0.51% MDH活性：   0.25～2.2U/L MDH同工酶：MDHs 80%～98.1% 以MDHm＞20%为异常 LDH/MDH：＜69岁者3.96±0.7 ＞70岁者4.55±0.51

疾病相关

沙眼

摘要

使用LDH-L比色操作法。

说明

在细菌性角膜溃疡和角结膜化学伤时，泪LDH和MDH活性下降。凡角结膜上皮损伤，LDH同工酶H/M比值和MDHm均有不同程度升高，但MDHm更能反映角膜组织损害的情况和病变程度。如在角膜溃疡和可疑干性角结膜炎(KCS)，MDHm升高而泪LDH的H/M比值却无显著变化。 泪LDH同工酶和LDH/MDH比值的测定有助于沙眼和慢性结膜炎的鉴别诊断。两者泪液LDH的H/M比值均明显下降，但沙眼时，泪液LDH/MDH比值无变化，而且LDH的M亚基升高更显著。

结论有效原因

(1)比色法： ①乳酸钾、乳酸钠也可作为LDH底物，但因其为水溶液，含量不够准确，且保存不当易产生酮酸类物质，抑制酶促反应。而乳酸锂为固体，稳定，易于称量。 ②除二乙醇胺缓冲液外，也可用Tris或焦磷酸缓冲液，避免了原金氏法中甘氨酸缓冲液对LDH的抑制作用，提高了阳性检出率。 ③比色应在5～15min内完成，否则吸光度降低。 ④结果＞2500U时，可用生理盐水稀释标本后再测，其结果乘以稀释倍数。 (2)连续监测法： ①标本勿溶血，当溶血达Hb 0.8g/L时，LDH活性可升高58%。 ②标本于室温(25℃)保存，2天内酶活性稳定，冰箱保存酶活性降低，－20℃过夜LDH3、LDH4则全部失活。 ③用血清或肝素抗凝血浆测定结果满意，草酸盐可抑制LDH活性。④复溶后溶液变浊或初始吸光度＞0.5应弃去。 ⑤利用正逆双向反应均可测定乳酸脱氢酶活性，但因反应温度、底物和缓冲液浓度不同，其参考区间也有差异。以乳酸和NAD为底物，在340nm监测吸光度增高速率为正向反应，以LD-L表示；以丙酮酸和NADH为底物，监测340nm吸光度下降速率为逆向反应，以LD-P表示。正逆反应两法相比，LD-L法的主要优点是：A.正向反应底物液的稳定性比逆向反应的稳定性大，前者冰箱可保存6个月以上，而后者仅几天；B.速率反应的线性范围(吸光度对监测时间t作图)较宽；C.重复性比LD-P好。由于逆向反应速度比正向反应速度快，其参考值约为LD-L的2倍。