类型

血浆

实验名称

抗凝血酶抗原含量,antifhrombin antigen

关联实验

关联问题

实验理由

何时实验

患者准备

采样

采样原则

用双抗体夹心法ELISA或免疫火箭电泳均可测定血浆AT︰Ag的含量。

正常值描述

AT-Ⅲ∶Ag(抗原)：259.8～320.2mg/L(免疫火箭电泳法)

疾病相关

严重肝脏疾病, DIC, 外科手术后, 血栓前状态, 血栓性疾病, 再生障碍性贫血

摘要

(1)将溶解后的兔抗人AT-Ⅲ血清(试剂A)按瓶签标示稀释倍数的一半，用电泳缓冲液稀释备用。另用水配成20g/L浓度的琼脂糖溶液。将上述两种溶液在56℃等量混匀，倾入夹有80mm×80mm×1.5mm“U”形模框的两块玻板中，待凝固后，于板之一侧打一排加样孔，孔径2mm，孔距3mm。 (2)将溶解后的标准血浆(试剂B)用水作1∶2、1∶4、1∶8、1∶16的稀释，样品也用水作1∶5稀释，然后用微量加样器分别定量加入加样孔，每孔5μl，于15V/cm电势梯度下，电泳6h(加样孔应置于负极侧)。 (3)电泳完毕，将凝胶板置4.4mmol/L磷钼酸溶液中，固定15min，量取各火箭峰，自加样中心至峰尖的高度(mm)。以不同稀释度标准血浆的峰高(X)对相应的AT-Ⅲ抗原含量(Y)在正坐标纸上制作标准曲线。再将样品的峰高在标准曲线上直接读出AT-Ⅲ抗原含量；亦可作直线回归运算，得回归公式Y＝bx＋a，将样品的峰高代入式中x，即得出ATⅡ∶Ag的含量Y。

说明

(1)AT-Ⅲ缺乏或减少：见于：1.遗传性AT缺陷：Ⅰ型患者AT含量及活性均减低；Ⅱ型患者AT含量正常但活性减低。杂合子患者AT活性一般在40%～60%。AT缺陷患者常并发静脉血栓形成和肺拴塞。在抗凝治疗中，若出现肝素治疗无效，应注意检查有无AT缺乏。2.获得性AT减低：进行性肝实质损伤，如肝硬化可致AT合成减少。肾病综合征时，AT随尿蛋白排泄而丢失增多。DIC、脓毒血症、先兆子痫时，AT因消耗增多而减少，故AT减少可作为DIC的诊断与监测指标之一。大型外科手术、烧伤也可使AT短时间下降，可能诱发血栓形成或DIC。3.新生儿：由于止血系统未成熟，在最初几天AT含量可仅为正常含量的30%左右。4.药物影响：肝素治疗初期，AT活性可降低，甚至低至20%～30%。雌激素治疗时，AT可伴随FⅡ、FⅦ、FⅨ、FⅩ升高而轻微降低。口服抗凝药时，AT因合成增加而升高。(2)AT-Ⅲ增高：见于血友病，口服抗凝剂和应用黄体酮等药物。再生障碍性贫血，心瓣膜病，尿毒症，肾移植。注：AT︰A和AT︰Ag同时测定，有助于AT缺陷症分型。

结论有效原因

(1)样品采用0.109mol/L枸橼酸钠抗凝，而不用肝素抗凝。 (2)样品不可反复冻融。