类型

血清

实验名称

苷-胆酸,Cholyglycine

关联实验

关联问题

实验理由

何时实验

患者准备

采样

采样原则

(1)乙醇提取法(RIA)法：胆酸是一种甾体类化合物，缺少可供磺化标记的基团。需要对结构进行修饰，制成甘胆酸一组胺结合物，将125I标记到组胺分子上。血清中的CG和血浆蛋白相结合，加乙醇使蛋白变性而分离。样品中的甘胆酸和标记物在缓冲溶液中竞争性与抗体结合，根据竞争抑制的基本原理，从标准曲线上求得血清CG浓度。 (2)直接测定法(RIA)法：血清中的甘胆酸绝大部分和蛋白质相结合，向反应液中加一定量的δ-苯胺-1-萘磺酸(ANS)使结合的甘-胆酸解离成游离状态，然后与标记物共同竞争性的和抗体结合。从标准曲线直接查得血清中的CG值。

正常值描述

乙醇提取法(RIA)法： 空腹男2.17±1.23μmol/L女2.18±1.04μmol/L餐后2h男3.79±1.90μmol/L女3.39±1.29μmol/L

疾病相关

GT; 丙型肝炎; 胆囊结石; 胆石症; 腹水; 肝癌; 肝损伤; 肝硬化; 黄疸; 原发性肝癌

摘要

(1)乙醇提取法(RIA)法： ①取血清0.1ml，加无水乙醇0.4ml，充分混合，离心(3000r/min)5min。 ②取10mm×75mm塑料管，按表1加入样品和试剂。③加入PR分离剂后，混合，放37℃水浴30min，离心(3500r/min)15min，弃去上清液，在自动γ免疫计数器上测放射性。 ④以B/B0Log或B/B0%为纵坐标，标准液浓度(μmol/L)为横坐标绘制标准曲线。从标准曲线上查得样品μmol/L，再乘5即得血清中甘胆酸浓度μmol/L。(2)直接测定法(RIA)法： ①取10mm×75mm塑料试管，按表2加入样品和试剂。②加入PR分离剂后混合，放37℃ 30min。离心15min，弃去上清液，测沉淀物的放射性强度。 ③以B/B0%对标准液浓度绘制标准曲线，依测定管的B/B0%从标准曲线上直接读出血清中甘胆酸μmol/L。

说明

(1)反映肝细胞损伤的敏感指标：急性肝炎、慢性活动性肝炎、肝硬化及原发性肝癌患者血清CG均明显升高，其阳性率均在80%以上，依次为急性肝炎＞慢性活动性肝炎＞原发性肝癌＞肝硬化＞慢性迁延性肝炎。当弥漫性肝损伤时，血清CG水平与肝脏病变范围及程度密切相关。急性肝炎、慢性活动性肝炎及重症肝炎患者，由于肝细胞广泛变性坏死，血清中CG与ALT同时升高，但以血清CG升高更敏感，升高幅度更大。11例肝功能正常或基本正常的混合性肝硬化，肝性腹水患者13例次血清CG检测值为10855～66328μg/L。阳性率为100%。Mannes报道，29例经病理或手术证实的ALT正常的肝炎后肝硬化患者空腹及餐后血清CG阳性率分别为93%和97%，而其余肝功能试验的阳性率在69%以下。张建军等报道272例肝胆疾病患者血清CG含量均明显高于对照组，急性肝炎、慢活肝、肝硬化、肝癌时阳性率均在90%以上，慢迁肝、肝炎恢复期及胆道疾病阳性率在60%以上，CG的敏感性显著高于常规肝功能试验。肖波等报道，肝炎后肝硬化患者和原发性肝癌患者血清CG含量的异常率明显高于常规肝功能试验。以上结果均表明，血清CG是反映肝损伤的敏感指标。急性肝炎肝功能指标的相关性研究发现，血清CG的变化与ALT、GGT和血清总胆红素呈正相关，但血清CG的恢复较ALT和血清总胆红素为迟，显示在反映残存病变方面血清CG优于ALT、血清总胆红素。丙型肝炎患者虽然症状较轻，但肝细胞的超微结构已经改变，这些改变常规肝功能试验不能检出，只有测其血清CG才能显示。 近年来众多学者认为，餐后2h测定CG较空腹时更敏感。当肝脏摄取CG或清除CG功能轻度下降时，空腹CG可能正常。但餐后2h肝脏负担最大。易发现血清CG升高，故检测其值更有意义。空腹与餐后血清CG相关性研究发现，空腹血清CG阳性率为32.1%，餐后则高达67.9%(P＜0.01)，21例空腹血清CG正常和稍高者，试餐后有12例增高。因此，对空腹CG正常或接近正常的可疑患者，宜进行餐后CG测定，可提高轻型肝病的检出率。 (2)用于急性肝炎的病情观察及预后判断：急性黄疸型肝炎患者，黄疸期ALT与血清CG阳性率均为100%；恢复期常规肝功能指标多恢复正常，ALT转阴率为97.87%，而CG仅为46.67%，二者间有显著性差异。50%以上的急性肝炎患者常规肝功能试验恢复正常，ALT转为阴性作为治愈出院者，而CG仍高于正常，提示肝脏仍有实质性损伤。因此有必要将血清CG是否恢复正常作为治愈出院的标准。根据血清CG进行适当调整或定期随访观察，有助于急性肝炎的病情监测。多数资料显示。急性肝炎患者在其恢复过程中CG持续升高，提示预后不良，有发展为慢性肝炎的可能，尤其在乙型肝炎中更为常见。 (3)判断慢性肝炎的活动程度及鉴别诊断：慢性迁延性肝炎患者，常规肝功能指标及组织学检查均未明显异常改变，而CG升高可作为肝炎活动或复发的早期敏感指标。有资料报道，慢性肝炎病情稳定持续缓解组(A组)及停药后复发组(B组)，当组织学检查无肝炎活动证据时，A组血清CG在正常或正常值的2倍以下，而B组大部分在正常值的2倍以上。说明血清CG可提示疾病缓解抑或复发。动态观察显示，疾病复发时血清CG升高先于ALT升高。因此，血清CG测定是监测慢性肝炎的较好指标，并可避免肝活检的创伤性检查。慢性活动性肝炎CG的增高程度和频率均明显高于慢性迁延性肝炎，故血清CG测定有助于二者的鉴别诊断。乙醇性肝病患者由于肝细胞摄取和排泄功能受影响较少，无论空腹或餐后血清CG均正常，而GGT则因位于肝细胞浆中的微粒体部分而显著升高，反映了光面内质网的增生，这对鉴别乙醇性肝病有一定价值。急性黄疸型戊型肝炎患者空腹血清胆汁酸均有不同程度的升高，但升高的幅度较急性黄疸型乙型肝炎为低。因此，检测急性期空腹胆汁酸，对病毒性肝炎的病原分型可能有价值。 (4)判断肝硬化的预后：Mannes等对76例肝硬化患者随访1年，以比较临床和实验室检查以及按Child分级与血清CG含量对肝硬化预后的意义，发现各项指标中，血清CG是预测肝硬化预后的最好指标。按患者血清CG升高程度分类，对肝硬化死亡率的预测与Child分类法结果相似。胡懋琳等报道，肝硬化患者血清CG含量与Child分级呈显著正相关，与血清白蛋白呈显著负相关。任成山等对106例肝硬化患者血清CG含量测定，并随访1年，依血清CG含量升高的程度，对病死率预测与Child分级比较。血清CG＜10μmol/L提示预后良好，45例中仅5例(11.1%)于1年内死亡，与Child A级的25例中2例(8.0%)死亡相近。血清CG＞20μmol/L则预后较差，32例中有22例(68.8%)在1年内死亡，近似于Child C级的33例有24例(72.9%)死亡。用Logistic同归分析对血清CG和Child分级的11个变量进行多元分析，只有血清CG最有统计学意义(P＜0.001)。这可能是由于胆酸升高与肝功能衰竭的关系比其他指标更为密切。张建民等对40例肝硬化患者血清CG含量进行了检测及1年的预后随访，发现血清CG与HA一样在判断肝硬化预后方面确实优于GGT、AKP及白蛋白，血清CG浓度高则预后差，死亡组与生存组之间有显著差异。因此，血清CG测定是判断肝硬化预后的良好指标。 (5)反映肝脏病的严重程度：Ferracis报道血清CG和ALT对严重肝脏病的特异性和敏感性无显著性差异。章华础等进一步研究发现，急性肝炎和重症肝炎血清CG的阳性率均为100%，而ALT的阳性率分别为73.7%和50%，不仅证明血清CG测定对严重肝病的诊断优于常规肝功能试验，且在临床上起到决定作用。Jara对病理证实的慢性持续性肝炎检测结果显示，常规肝功能的阳性率在8%～72%之间，而血清CG的阳性率达100%，且重症肝炎血清CG升高幅度明显高于ALT。     (6)其他疾病：原发性肝癌(PHC)患者AFP和CG的阳性率分别为78.3%和85.8%，表明血清CC对PHC的诊断具有重要价值。胆石症患者CG明显升高，可为正常的50倍，一般认为单纯胆囊结石患者空腹CG可正常，胆囊摘除后反而升高。因为胆囊摘除后，胆汁酸持续地排入肠腔，致使空腹CG升高。梗阻性肝病时，CG水平增高10～20倍。另外，药物性胆汁淤积症如长期服用苯妥英钠和异烟肼者，血清中CG含量亦增高。 综上所述，血清CG测定是诊断急、慢性肝炎，重症肝炎的敏感指标，对疾病的病情观察和预后判断、鉴别慢性活动性肝炎与慢迁肝、判定慢活肝病变的发展或缓解、监测疗效及复发以及肝癌的诊断等具有重要的参考价值，对胆石症及梗阻性肝病的诊断也有一定价值。

结论有效原因

测定苷氨胆酸与苷鹅脱氧胆酸的比值可能具有诊断价值，因为约80%肝细胞疾病患者该比值＜1，而80%胆汁郁积性疾病患者该比值＞1。