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血浆正铁血红蛋白
采样原则
血红蛋白(Hb)被高铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白(Hi)再与氰化钾作用,形成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白(HiCN),比色测定。
正常值描述
男性:130~170g/L;女性:110~150g/L;新生儿:170~200g/L;儿童:120~150g/L。
摘要
取血液20μl,加入稀释液5ml中,混匀,静置5min后用分光光度计或比色计测定,于540nm波长,或绿色滤光片,用水校正吸光度为零点,测吸光度计算或查标准曲线,即得结果。
说明
(1)生理性增加:新生儿,高原居住等。(2)病理性增加:真性红细胞增多症,代偿性红细胞增多症。(3)减少:各种贫血、白血病、产后、失血后等。
结论有效原因
HiCN是目前血红蛋白各种测定法中最准确的方法,除HbS、HbC外其他血红蛋白均可转化成HiCN,本文介绍试剂为国际血液学标准化委员会(ICSH)所推荐。由于HiCN的毫摩尔吸光系数得到国际公认,故可用经严格校准的高级分光光度计根据吸光系数直接计算,此种计算并非检验科常规方法。其计算公式如下:
表示540nm测得吸光度,251为血液稀释倍数,11.0为Hb分子单体毫摩尔吸光系数,1.0是光径,16114.5是单体分子量,除1000即由毫克(mg)换算为克(g)。稀释液应贮存于棕色玻璃瓶中,不得贮存于塑料瓶中,否则氰离子吸附于塑料瓶壁,使测定结果偏低。稀释液含******,切勿用口吸液。测定后废液应加入等量水稀释,并按每升加次氯酸钠溶液35ml,混匀,敞开容器,放置一夜后排入下水道。血红蛋白测定尚有多种方法,目前所报道的方法均未建立本身的标准物,采用此类方法务请慎重,须以HiCN法为参考法进行评价后方可使用。尤须注意现在市售血红蛋白质控液均为HiCN法质控液,用于其他方法会有明显偏倚。