类型

全血

实验名称

血液碳氧血红蛋白,Carboxy-hemoglobin

关联实验

关联问题

实验理由

何时实验

患者准备

采样

采样原则

(1)碳氧血红蛋白定性试验：一氧化碳与血红蛋白结合后，形成樱桃红色的碳氧血红蛋白，它对碱抵抗力较正常血红蛋白为强。 (2)碳氧血红蛋白双波长定量测定：用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)将血中的HbO2、MetHb还原成Hb，使血中多组分的血红蛋白转化为只有Hb和COHb两个组分，前者的最大吸收波长为320nm，后者为432nm，在分光光度计上分别测出被检血样在420nm和432nm两个波长处的吸光度，代人依比尔定律建立的联立方程式，求出血样COHb含量。

正常值描述

定性：阴性 定量：不吸烟者：0～0.023   (0～2.3%)       吸烟者：  0.021～0.042   (2.4%～4.2%，＜6.5%)

疾病相关

一氧化碳中毒

摘要

(1)碳氧血红蛋白定性试验： ①取试管2支，各加蒸馏水3～5ml，一管加患者血液3滴，另一管加正常人对照血3滴，混匀。此时。如患者血中有一氧化碳，则血液呈樱桃红色。 ②每管各加50g/L NaOH 1滴，轻轻混合，正常对照管呈绿褐色，如患者血液中有碳氧血红蛋白，则溶血液仍呈樱桃红色，为阳性；如与正常对照色泽一致为阴性。 (2)碳氧血红蛋白双波长定量测定： ①F值制定：制备Hb溶液(不含COHb)和饱和COHb溶液(COHb含量为100%)。取不吸烟并于近期无CO接触史者的全血50μl，加入6.0ml试剂Ⅱ中，放置5min，使充分溶血。另取两只25.0ml容量瓶，每瓶准确加入上述溶血液2.0ml，在通风橱内，其中一瓶通入空气5min；另一瓶通入煤气(CO)1min，然后通入氮气2min。每瓶加入Na2S2O4 250mg，加试剂Ⅰ至刻度，加塞颠倒3～5次，使其溶解。10min后，用420nm和432nm两波长比色，以试剂Ⅱ调零，记录AHb420、AHb432、ACOHb420、ACOHb432。根据比尔定律：A＝a·b·c，因为Hb和COHb均来自同一份样，血红蛋白含铁摩尔浓度(c)相同，比色条件相同(b)，故：应用上法，测得F值分别为F1＝1.3041；F2＝0.5742；F3＝1.8627。 ②样品测定：取小试管一支，加试剂Ⅱ1.2ml，加入常规采取的指血10μl，混匀5min使之溶血，另取带塞试管一支，取上述溶血液0.2ml与2.3ml试剂Ⅰ相混合，加Na2S2O4 25mg，加塞颠倒使其溶解，10min后用试剂Ⅱ调零，在窄带宽型分光光度计上用420nm和432nm两个波长比色，记录A420和A432。

说明

升高：一氧化碳中毒(CoHb＞50%致死)。

结论有效原因

(1)碳氧血红蛋白定性试验： ①观察结果须及时，否则樱桃红色逐渐褪去，不易分辨。 ②本试验敏感性较差，血液中一氧化碳含量到一定程度时才显阳性。如患者事先已采取通气措施，血中一氧化碳含量下降，试验可阴性。但临床症状、体征仍可能存在。 (2)碳氧血红蛋白双波长定量测定： ①COHb定量测定中，没有标准品，确定公式中F1，F2，F3的值是COHb准确定量的前提，虽然有文献提供F值，但由于各实验室的设备条件不完全一致，如分光光度计的单色光波长宽度、波长误差等，因此不宜直接套用文献F值，应依据所使用的分光光度计确定F值。F值确定后，只要仪器条件不改变，可以一直使用，故不会增加常规样品测定的工作量。 ②在制备100%饱和度COHb(用于制定F值)时，如无民用煤气，也可用化学方法制备CO：取甲酸100ml和硫酸150ml混合，产生的气体依次通入NaOH(5mol/L)、水和CaCl2(0.5mol/L)中进行纯化后收入乳胶手套内备用。 ③本法的方法学评价结果：样品显色后，30min内呈色稳定；重复试验结果(n＝20)：＝10.41%，s＝0.21，CV3.7%；回收率为92.7%～106.3%。