血清尿素,Urea(Ure)
类型
血清
实验名称
血清尿素,Urea(Ure)
关联实验
关联问题
实验理由
何时实验
患者准备
采样
采样原则
(1)二乙酰-肟法:二乙酰-肟与强酸作用生成二乙酰,后者与尿素在酸性条件下,缩合成红色的二嗪衍生物。试剂中的硫氨脲和硫酸镉具有增色和稳定作用。 (2)酶偶联速率法:尿素在尿素酶作用下水解成NH4+和CO2,NH4+、NADH和α-酮戊二酸在谷氨酸脱氢酶作用下生成CO2、谷氨酸和NAD+。由于NADH被氧化成NAD+,在340nm吸光度降低,其吸光度降低值与尿素浓度成正比。
正常值描述
(1)二乙酰-肟法:2.0~7.1mmol/L。 (2)酶偶联速率法:2~7.1mmol/L。
疾病相关
腹水; 腹泻; 肝硬化; 甲状腺功能亢进; 慢性肾炎; 慢性肾盂肾炎; 前列腺肥大; 上消化道出血; 烧伤; 肾结核; 脱水
摘要
(1)二乙酰-肟法: ①试管分别标明空白管“B”、测定管“U”、标准管“S”。 ②分别于测定管加血浆(清)20μl,标准管加标准应用液20μl,空白管加蒸馏水20μl。 ③各加酸性试剂3ml、二乙酰-肟试剂3ml。 ④充分混匀,煮沸加热10min,取出、冷却。 ⑤520nm波长,空白管调零比色、读取标准管及测定管吸光度。 (2)酶偶联速率法:试剂样品比为70∶1,37℃,340nm,延滞时间30s,读数时间30s。具体分析条件可据试剂盒和仪器的说明书确定,最好每次定标。
说明
(1)增高: ①肾脏疾病:如急性肾衰、慢性肾炎、肾动脉硬化、慢性肾盂肾炎、肾结核、肾肿瘤晚期等,肾功能轻度受损时,BUN可无变化。当60%~70%有效肾单位受损时,BUN才增高。因此BUN测定不能作为早期肾功能受损的指标,但对肾功能衰竭,尤其是尿毒症诊断有特殊价值,并可判断病情,估计预后。根据BUN测定结果可判断肾功能衰竭的程度。A.肾功能衰竭代偿期:Ccr下降,血Cr正常。BUN正常或轻度升高(<9mol/L)。B.肾功能衰竭失代偿期(氮质血症期或尿毒症前期):Ccr明显下降(<0.83ml/s),血Cr增高(>90mmol/L),BUN中度升高(>9mmol/L)。C.尿毒症期:Ccr<0.33ml/s,血Cr>445μmol/L,BUN>20mmol/L。 ②肾前性或肾后性因素引起尿量显著减少或尿闭,如剧烈呕吐、腹泻引起的脱水、水肿、腹水、循环功能衰竭,以及尿路结石、前列腺肥大、肿瘤等引起的尿路梗阻。 ③体内蛋白质分解过多,如大面积烧伤、大手术以后,上消化道出血、甲状腺功能亢进及急性传染病等。此时BUN增高,而其他肾功能试验结果大致正常。 (2)降低:临床较少见。主要系肝实质受损,生成减少。如急性黄色肝萎缩、肝硬化、中毒性肝炎,严重贫血等。
结论有效原因
(1)二乙酰-肟法: ①尿素不能直接与二乙酰-肟反应,加入二乙酰-肟和强酸的目的是生成能与之反应二乙酰。加入Fe3+(或Cd2+)是为消除反应过程中生成的羟胺的干扰,硫氨脲可使反应的敏感度提高20倍。以前许多书刊介绍的方法是将二乙酰-肟与硫氨脲配在一起。但两者可生成针状黄色物质,用硫氨脲配在酸试剂中克服了这一缺点。 ②酸浓度与吸光度呈正相关,故酸浓度要准确。所用试管口径,放入沸水中的倾斜角度要尽量一致,水液面要在试管内液面之上,煮沸时间以放入试管重新沸腾计。最好每次测定标准和质控。观察尿素动态变化时,应嘱患者恒定食入蛋白,并空腹采血。样本不能立即分析时,可提取血清(或血浆)于密封样杯中,置4℃存放可稳定7天。结果大于20mmol/L时,样本改为10μl,结果乘以2。 ③此法虽然加入硫氨脲和镉离子,在一定程度上增进了显色强度和色泽稳定性,但仍有褪色现象(每小时约5%),所以,煮沸加热显色冷却后,应及时比色。 ④所用20μl加样器务必校正无误后方可使用。 ⑤血浆(清)中尿酸、肌酐、氨基酸等含氮物对本试验无干扰,溶血可能结果偏高,黄疸可能结果偏低。 ⑥血浆(清)尿素含量与进食的蛋白质含量有密切的关系。在高蛋白饮食时,血浆(清)中的尿素含量可明显升高,而低蛋白饮食时,则含量显著降低。 (2)酶偶联速率法: ①该法最常出现的问题是试剂失效或反应系统被污染。试剂中最不稳定的是NADH和谷氨酸脱氢酶。在分析过程中应注意以下几个方面:如用血浆则不能用含氟化合物或NH4+的抗凝剂,前者可抑制尿素酶活性,后者则可参与反应。 ②试剂空白吸光度应大于1.2A,否则说明NADH被氧化。同种试剂、仪器,在分析条件不变的情况下,测定得F值应相对恒定,否则说明试剂失效。 ③复溶试剂勿振动,以免酶变性失活。必须用无氨水复溶试剂。试剂杯、样品杯、反应杯要无氨、洁净、无酸碱污染,应每次定标,并跟测质控血清。
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