类型

血清

实验名称

血清乳酸脱氢酶,Lactic Dehydrogenase

关联实验

关联问题

实验理由

何时实验

患者准备

采样

采样原则

(1)比色法：LDH以NAD＋作氢的受体，催化乳酸脱氢，生成丙酮酸，后者与2，4-二硝基苯肼作用，生成丙酮酸二硝基苯腙，在碱性溶液呈红色，根据颜色深浅求出酶活性。 (2)连续监测法：LDH可催化L-乳酸生成丙酮酸，同时NAD＋还原成NADH，在340nm处吸光度的增高速率与酶活力成正比。

正常值描述

(1)比色法：150～450U/L。 (2)连续监测法：男80～280U/L                女100～230U/L

疾病相关

恶性淋巴瘤; 肝癌; 转移性肝癌

摘要

(1)比色法：按表1操作。 混匀，室温放置5min后，在440nm波长，比色杯光径1.0cm，蒸馏水调零点，读取各管吸光度，以AU-AC之差值查标准曲线，求出LDH活力单位。 (2)连续监测法：各实验室可根据本室生化自动仪型号及说明书操作。主要参数为340nm波长，37℃，吸样量500μl，连续监测时间60s，标本与试剂体积之比为1∶50。

说明

LDH测定常用诊断心肌梗死、肝病和某些恶性肿瘤。 (1)心肌梗死：发病10～12h升高，24～48h达高峰，8～9天后恢复正常。与CK相比，虽然酶活性出现较迟，阳性率较低，但持续时间长，且活性增高的程度与心肌梗死的病情密切相关，梗死范围越大，其酶活性越高。若LDH增高后恢复迟缓，或在病程中再次增高，提示梗死范围扩大，预后不良。 (2)肝脏疾病：急性肝炎或慢性活动性肝炎LDH常显著或中度升高。其敏感度略低于ALT。肝癌时LDH活性明显升高，尤其是转移性肝癌增高更显著。可达1000U/L。 (3)血液病：白血病、巨幼红细胞贫血、恶性淋巴瘤等LDH活性升高。 (4)其他：营养不良、横纹肌损伤、胰腺炎、肺梗塞等LDH活性也升高。

结论有效原因

(1)比色法： ①乳酸钾、乳酸钠也可作为LDH底物，但因其为水溶液，含量不够准确，且保存不当易产生酮酸类物质，抑制酶促反应。而乳酸锂为固体，稳定，易于称量。 ②除二乙醇胺缓冲液外，也可用Tris或焦磷酸缓冲液，避免了原金氏法中甘氨酸缓冲液对LDH的抑制作用，提高了阳性检出率。 ③比色应在5～15min内完成，否则吸光度降低。 ④结果＞2500U时，可用生理盐水稀释标本后再测，其结果乘以稀释倍数。 (2)连续监测法： ①标本勿溶血，当溶血达Hb 0.8g/L时，LDH活性可升高58%。 ②标本于室温(25℃)保存，2天内酶活性稳定，冰箱保存酶活性降低，－20℃过夜LDH3、LDH4则全部失活。 ③用血清或肝素抗凝血浆测定结果满意，草酸盐可抑制LDH活性。④复溶后溶液变浊或初始吸光度＞0.5应弃去。 ⑤利用正逆双向反应均可测定乳酸脱氢酶活性，但因反应温度、底物和缓冲液浓度不同，其参考区间也有差异。以乳酸和NAD为底物，在340nm监测吸光度增高速率为正向反应，以LD-L表示；以丙酮酸和NADH为底物，监测340nm吸光度下降速率为逆向反应，以LD-P表示。正逆反应两法相比，LD-L法的主要优点是：A.正向反应底物液的稳定性比逆向反应的稳定性大，前者冰箱可保存6个月以上，而后者仅几天；B.速率反应的线性范围(吸光度对监测时间t作图)较宽；C.重复性比LD-P好。由于逆向反应速度比正向反应速度快，其参考值约为LD-L的2倍。