公开(公告)号
CN1951895A
公开(公告)日
2007.04.25
申请(专利)号
CN200610063478.4
申请日期
2006.11.03
专利名称
一种贯叶金丝桃中金丝桃素提取物的提取方法
主分类号
C07C50/36(2006.01)I
分类号
C07C50/36(2006.01)I
分案原申请号
优先权
申请(专利权)人
深圳职业技术学院
发明(设计)人
张俊松;王晓利
地址
518055广东省深圳市西丽湖
颁证日
国际申请
进入国家日期
专利代理机构
深圳市维邦知识产权事务所
代理人
黄 莉
国省代码
广东;44
主权项
一种贯叶金丝桃中金丝桃素提取物的提取方法,其特征在于,包括如下步骤: A、制备金丝桃素硅胶柱层析提取物步骤,又包括如下分步骤: A1、准备样品,将贯叶金丝桃粗提物加入甲醇中溶解,超声波处理20~40min后过滤,再在滤液中加入一定量的柱层析硅胶,混匀后蒸干溶剂; A2、配制洗脱液,采用氯仿-甲醇梯度洗脱剂,洗脱剂极性逐渐增大,氯仿∶甲醇=9∶1-8.5∶1.5-8∶2-7.5∶2.5(v/v); A3、装柱,将一定量的柱层析硅胶与氯仿:甲醇=9∶1的初始洗脱剂混匀,浸泡8~12小时,在色谱柱下端垫上一层防止漏胶的脱脂棉,缓慢将处理好的硅胶倒入色谱柱,同时不停地敲打色谱柱外侧,使硅胶装实,随着洗脱剂的流出,硅胶不断沉积下来,沉降6~10小时; A4、上样,继续沉降直至溶剂仅够覆盖硅胶表面为止,将处理好的样品缓慢加入色谱柱,随着溶剂的流出,形成一层样品层; A5、硅胶柱洗脱,采用氯仿-甲醇洗脱剂梯度洗脱,洗脱剂极性逐渐增大; A6、组分的收集,将所收集的样品经由TLC检测,合并相同组分,用旋转蒸发仪蒸干,得到金丝桃素硅胶柱层析提取物; B、制备金丝桃素凝胶过滤提取物步骤,又包括如下分步骤: B1、凝胶的预处理与装柱,将葡聚糖凝胶干粉浸泡于60~70%乙醇中6~10小时,洗去可能存在的残留物,湿态不间隙装柱; B2、上样,将金丝桃素硅胶柱层析提取物用甲醇溶解,再经超声波处理后过滤,然后缓慢沿柱壁上样,当溶液缓慢下降至柱内,缓慢加入洗脱液; B3、洗脱及收集,采用甲醇为洗脱剂进行洗脱,将洗脱后的提取物进行收集即得到提取物产品。
摘要
本发明涉及一种贯叶金丝桃中金丝桃素提取物的提取方法,一种贯叶金丝桃中金丝桃素提取物的提取方法,包括如下步骤:A.制备金丝桃素硅胶柱层析提取物步骤,又包括如下分步骤:A1准备样品、A2配制洗脱液、A3装柱、A4上样、A5硅胶柱洗脱、A6组分的收集;B.制备金丝桃素凝胶过滤提取物步骤,又包括如下分步骤:B1凝胶的预处理与装柱、B2上样、B3洗脱及收集,即得到提取物产品。本发明工艺简单,提取物中金丝桃素含量高,其作为光敏物质,可进行光动力治疗(Photodynamic therapy,PDT),对人肝癌细胞系HepG2、人肺癌细胞系A549、SpcA1和人乳腺癌细胞系MDA231有明显生长抑制作用。
国际公布
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