3126 IgG含量测定法
来源
三部
分类
三部通则
内容
(紫外-可见分光光度法)
本法系依据免疫球蛋白G(IgG)与相应的抗体特异性结合后,在适宜的电解质、温度、pH 条件下,产生凝集反应,形成抗原-抗体复合物,根据供试品的吸光度求出供试品中IgG的含量。
试剂 (1)缓冲液 称取三羟甲基氨基甲烷(Tris)12.42g ,氯化钠9g、聚乙二醇6000 50g、牛血清白蛋白(BSA)1g、叠氮化钠(NaN3)1g,加水溶解,用1.0mol/L盐酸调pH值至7.4,加水稀释至1000ml。
(2)抗人IgG血清 按说明书要求将冻干抗人IgG血清复溶,按标示效价取一定量抗人IgG血清,加缓冲液稀释至抗体最终效价为1:4(例如抗人IgG血清效价为1:100,量取原液2ml加抗体缓冲液48ml),充分混匀,0.45μm膜过滤。4℃保存备用。
IgG标准品溶液的制备 用生理氯化钠溶液将IgG标准品在每1ml含0.2~6.0mg范围内做适当的系列稀释(通常做5个稀释度)。
供试品溶液的制备 用生理氯化钠溶液将供试品稀释成高、中、低3个稀释度,其IgG含量均应在标准曲线范围内。
测定法 取供试品溶液10μl,加入已预热至37℃的抗体液1ml,混匀,每个稀释度做2管,置37℃水浴中保温1小时,充分混匀,照紫外-可见分光光度法(通则0401),在波长340nm处分别测定吸光度.
用IgG标准品溶液10μl替代供试品溶液,同法操作。
计算标准品和供试品不同稀释度溶液的吸光度的均值。以标准品溶液的IgG含量的对数对其相应的吸光度的对数作直线回归,求得直线回归方程,相关系数应不低于0.99;然后将供试品溶液吸光度的对数值代入直线回归方程,求得值的反对数,再乘以稀释倍数,求取每1ml供试品溶液IgG含量,再由供试品各稀释度IgG含量求平均值,即为供试品IgG含量(g/L) 。
【附注】 (1)全部反应管必须在10分钟内测量完毕。
(2)设置紫外分光光度计狭缝宽度(Slit Width)为2nm 。
(3)每次测定可根据供试品IgG含量,适当调整标准品溶液中IgG含量范围。

最新招商产品更多>>

免责声明:以上所展示的信息由企业自行提供,内容的真实性、准确性和合法性由发布企业负责,医药网对此不承担任何责任。
相关链接:医药研究数据| 医药资料| SDA药品评审中心| 中医网| 中药处方系统| 爱视立眼贴
专业提供药品信息、药品招商、药品代理、保健品招商、医药原料采购供应的中国药品信息网站平台
版权所有 © 2003-2028 盗冒必究  客服热线:0575-83552251 / 13754370441  QQ客服:药品信息客服
浙ICP备16010490号-2 增值电信业务经营许可证:浙B2-20220931 互联网药品信息服务资格证书编号:(浙)-经营性2023-0215 浙公网安备:330683240604819103159
 医药代理商群1:药药网药品采购交流医药代理商群2:药药网药品采购交流2医药代理商群3:药药网药品采购交流3