内容
【摘要】 【目的】观察疏肝健脾活血法对胃溃疡(gu)患者胃液表皮生长因子（egf）及胃黏膜表皮生长因子受体（egfr）表达的影响。【方法】将60例经胃镜检查确诊的gu患者,随机分为疏肝健脾活血法中药治疗组（简称中药组）和西药对照组（简称西药组）各30例，另设15例为正常对照组（简称对照组）。主要观察临床疗效及治疗前后胃液egf、胃黏膜egfr的变化情况。【结果】（1）在疗效方面，中药组治愈25例，显效3例，无效2例，总有效率为9333%；西药组治愈23例，显效4例，无效3例，总有效率为9000%；2组比较差异无显著性意义（p 005），表明中药组疗效与西药组相仿。（2）中药组和西药组均能显著提高胃液egf及胃黏膜egfr的表达,中药组与西药组比较差异有显著性意义(p 005)。【结论】提高胃液egf及胃黏膜egfr的表达,可能是疏肝健脾活血法治疗胃溃疡疗效显著、复发率低的机制之一。
【关键词】 胃溃疡/中药疗法 四逆散/治疗应用 四君子汤/治疗应用 丹参饮/治疗应用
abstract: objectiveto investigate the effect of therapy of soothing liver, strengthening spleen and activating blood on expression of epidermal growth factor (egf) and its receptor (egfr) in patients with gastric ulcer (gu). methodssixty gu patients confirmed by gastroscope examination were equally randomized into two groups: the herbal treatment group was given herbal medicine with the actions of soothing liver, strengthening spleen and activating blood, and the western medical treatment group was given routine western medicine. fifteen healthy volunteers served as the normal control group. after treatment, the therapeutic effectwasevaluated, andthe changes of egf in the gastric juice as well as egfr in the gastric mucosa were observed before and after treatment. resultsafter treatment, 25 patients were cured, 3 markedly effective, 2 ineffective and the total effective rate was 9333% in the herbal treatment group; 23 patients were cured, 4 markedly effective, 3 ineffective and the total effective rate was 9000% in the western medical treatment group. the total therapeutic effect in the herbal treatment group was similar to that in the western medical treatment group (p 005). egf expression in the gastric juice and egfr expression level in the gastric mucosa were increased in the two treatment groups after treatment (p 005 or p 001 compared with those before treatment), and the improvement in the herbal treatment group was superior to that in the western medical treatment group (p 005). conclusionincrease of egf expression in the gastric juice and egfr expression level in the gastric mucosa is probably contributed to the mechanism of therapy of soothing liver, strengthening spleen and activating blood for the treatment of gastric ulcer with low recurrence rate.
key words:gastric ulcer/tcd therapy;sini powder/therapeutic use;sijunzi decoction/therapeutic use;danshen decoction/therapeutic use
疏肝健脾活血法是治疗胃溃疡的常用方法,临床疗效显著,具有治愈率高、复发率低、毒副作用少的特点,但其作用机制仍未完全明了。www.11665.coM本研究通过观察疏肝健脾活血法中药对胃溃疡(gu)患者胃液表皮生长因子(epidermal growth factor,egf)及胃黏膜表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,egfr)表达的影响,旨在探讨其防治胃溃疡的作用机制。现将结果报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料参照《中药新药临床研究指导原则》(2002版)中胃溃疡西医诊断及分期标准,选择经胃镜检查证实的18～65岁的活动期(a1期)胃溃疡患者60例,排除药物性、应激性或其他慢性病所致的胃溃疡以及并发出血、穿孔及癌变的病例,按照随机、对照的原则,将入选病例分为疏肝健脾活血法中药治疗组(简称中药组)30例和西药对照组（简称西药组）30例,同时选择经我院预防保健科体检合格且排除有胃溃疡病史的18～65岁健康人15例作为正常对照组（简称对照组）。
1.2 治疗方法中药组以四逆散、四君子汤合丹参饮加减组方：柴胡10 g,白芍20 g,枳壳15 g,党参20 g,白术15 g,茯苓15 g,甘草6 g,丹参20 g,砂仁(后下)6 g。每天1剂,水煎分2次服。西药组给予奥美拉唑胶囊20 mg,每天1次口服。幽门杆菌(hp)阳性者先使用奥美拉唑20 mg＋克拉霉素500 mg＋阿莫西林1 000 mg,每天2次,连用7 d,以行抗hp治疗。2组均4周为1个疗程,连续治疗3个疗程。正常对照组不给予药物治疗。
1.3 观察项目
1.3.1 2组临床疗效参照《中药新药临床研究指导原则》(2002版)中胃溃疡的疗效评定标准。
1.3.2 egf和egfr检测中药组和西药组治疗前后行胃镜检查并取材检测egf及egfr,正常对照组也于同期检测上述指标。
1.3.2.1 标本采集胃液收集：胃镜检查前禁食12 h,禁用消泡剂,经内镜活检孔以聚乙烯塑料管抽吸胃液约3～4 ml,置入试管中,立即煮沸5～10 min,-20℃冰箱低温保存待测。 胃黏膜采集：在溃疡边缘采集胃黏膜组织3～4块,标本迅速浸入40 g/l多聚甲醛(以01 mol/l pbs配制,ph为74)中固定16 h,脱水,常规石蜡包埋,制备5 μm厚连续切片。
1.3.2.2 检测方法采用放射免疫法检测胃液egf。125iegf放射免疫分析试剂盒购自中国原子能科学研究院。按试剂盒说明操作。 采用免疫组化法检测胃黏膜egfr。链酶亲和素—生物素—过氧化物酶复合物(sabc)试剂盒、egfr免疫组化试剂盒均为武汉博士德生物工程公司产品。按试剂盒说明操作，并在光学显微镜下观察显色反应,阳性细胞胞质着色均呈棕黄色,应用计算机图像分析仪定量测定,每组随机抽取10例患者的切片各1张,每张随机选取5个视野作图像分析,以每个像素点0389 μm长,在4306 μm×104 μm量窗下测量并记录积分吸光度值(d)，以阳性细胞占总面积百分比表示阳性细胞百分率。
1.4 统计学方法采用spss 120统计软件进行数据的统计分析。计量资料多组间比较用方差分析和q检验,组内前后比较用t检验，计数资料采用卡方检验，等级资料用ridit检验。 2 结果
2.1 临床疗效比较表1结果显示，中药组与西药组疗效比较差异无显著性意义(p 005) ,表明中药组的疗效与西药组相仿。表1临床疗效比较（略）
2.2 胃液egf变化比较表2结果显示,治疗前中药组和西药组患者的胃液egf水平均明显低于对照组(p 001)。治疗后2治疗组胃液egf水平明显提高(与治疗前比较,p 005或p 001),但中药组的作用明显优于西药组(p 005),表2各组治疗前后胃液egf含量变化比较(略)
2.3 胃黏膜egfr变化比较表3结果显示，治疗前中药组和西药组的积分吸光度值和阳性细胞百分率均明显低于对照组(p 005或p 001)。治疗后2治疗组的积分吸光度值和阳性细胞百分率均明显提高(与治疗前比较,p 005或p 001),但中药组的作用优于西药组(p 005),且已接近对照组的水平(p﹥005)。表3各组治疗前后胃黏膜egfr变化比较(略)
3 讨论
gu是临床常见病、多发病,其发生是由于胃黏膜防御因子和损伤因子失衡所致,具有合并症多、易复发、易恶化癌变的特点［1］。现代医学采用抑制胃酸、杀灭hp、保护胃黏膜等方法联合治疗本病,短期内疗效甚佳,治愈率较高,但同时存在复发率高的问题,6个月内复发率高达50％,一年内复发率高达80%,而5年内几乎100%复发［2-3］。其复发与溃疡愈合质量的好坏密切相关,改善溃疡愈合质量可减少溃疡复发。
tarnawski等［4］研究结果提出,溃疡瘢痕的再上皮化和腺结构重建是在egf及egfr的调控下完成的。egf能抑制壁细胞分泌胃酸和促进胃黏膜上皮组织、细胞内dna、rna及蛋白质的合成,有利于胃肠道黏膜的再生和溃疡的愈合［5］；同时还具有促进上皮增殖、组织修复和细胞保护作用,可增加胃黏膜的血流量,促进血管生成及结缔组织再生,促进黏膜分泌重碳酸盐,在保护胃黏膜免受损伤因子破坏,维持胃肠黏膜完整性方面起着非常重要的作用,对胃肠黏膜具有保护、营养、促成熟作用［6-7］。但egf必须与egfr结合才能发挥以上作用［8］。当egf到达靶细胞表面时,很快与细胞质膜上egfr结合,诱导其产生某种变构,形成二聚体。通过与egf有效结合,egfr能增加细胞内dna、rna和蛋白质的合成,促进胃肠黏膜增殖、发育及修复,增加胃黏膜血流量,减少胃酸分泌,从而提高胃溃疡的愈合质量,发挥抗溃疡作用［9］。egf的降低与gu的发生密切相关,且egf在溃疡愈合中起重要作用［10］。
中医学认为,胃溃疡病位在胃,与肝脾两脏密切相关。肝气郁结,横逆犯胃,影响脾胃气机,导致脾胃气机郁滞、脾主升清与胃主降浊功能失调,则出现胃痛、胃胀、泛酸等症。长期肝木横克脾土,必定导致脾虚；或患病后各种病理因素损伤脾胃而导致脾胃虚弱。脾为气血生化之源,脾胃互为表里之脏腑。脾虚则气血生化不足,胃失濡养,不荣则痛,日久则易出现溃疡及反复发作,“久病入络、久痛留瘀”，瘀血阻滞胃之脉络,气血运行不畅,故不通则痛；瘀久则胃失濡养,久则遂生溃疡。瘀血阻滞不仅是胃溃疡反复发作的结果,更是其病情迁延、难治难愈的重要环节。故肝郁脾虚血瘀为胃溃疡发生及复发的主要病理环节,疏肝健脾活血法为其基本治疗大法。本研究结果表明,中、西药组经3个疗程治疗后的总有效率相当,表明中药组治疗gu的临床疗效与西药对照组相仿,但其egf与egfr的表达量明显高于西药对照组,这可能是其疗效显著且治愈率高、复发率低的机制之一。
【参考文献】 ［1］叶任高. 面向21世纪课程教材·内科学［m］. 5版. 北京：人民卫生出版社,2002：398-409. ［2］林庚金. 消化病新概念［m］ . 上海:上海医科大学出版社,1997：44. ［3］王博,姚保泰,吴敏. 中医药抗消化性溃疡复发的研究进展［j］. 吉林中医药,2003, 23(7)：51． ［4］许春娣.表皮生长因子在消化性溃疡愈合中的作用［j］.国外医学：儿科学分册,1997,24(3)：123． ［5］lipscomb g r, painter j,riley s,et a1.role of acid and salivary epidermal growth factor in gastric mucosal adaptation to naproxen in man［j］.scand j gastroenterol,1998, 33：790． ［6］milani s, ahbro a.role of growth factor and their receptors in gastric ulcer healing［j］.microsc res tech,2001,53：360. ［7］陈玲,刘皖君.表皮生长因子及其生物学效应［j］.国外医学:儿科学分册, 1997, 24：240. ［8］李文锋.egf研究进展［j］.生命的化学, 1992, 12：5. ［9］肖作亮,王雁,黎颖哲,等.人胃液表皮生长因子在消化性溃疡发生与愈合中的作用［j］.北京医学, 1997, 19：289. ［10］谭永港,舒晴,邱猛进,等. 表皮生长因子及其受体mrna在胃溃疡发生与愈合过程中的表达［j］. 世界华人消化杂志, 2005, 13(14):1768.