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乳腺癌中雄激素受体的表达及临床意义 【关键词】 乳腺肿瘤;受体，雄激素;流式细胞术 【摘要】 目的 探讨乳腺癌中雄激素受体的表达情况及临床意义。方法 应用流式细胞技术检测乳腺癌组织中雄激素受体的表达情况，并与临床特点、病理指标进行比较分析。结果 乳腺癌组织中雄激素受体(ar)的表达与肿瘤大小有关联，肿瘤≤2 cm者，雄激素受体表达较高(427±42)，与2～5 cm肿瘤及﹥5 cm肿瘤[(343±32，314±29)]相比差异有统计学意义(p=0.000);其表达与组织学分级有关联，组织学分级ⅰ级者雄激素受体表达值较高，与ⅱ、ⅲ级相比差异有统计学意义(p=0.000)。与er蛋白表达呈正相关(r=0.347，p=0.000)。结论 雄激素受体的高表达可能预示乳腺癌恶性程度低，有望成为一个新的预后指标。 【关键词】 乳腺肿瘤;受体，雄激素;流式细胞术 the significance of androgen receptor in breast carcinoma li jinghua*,liu keye,wang xiaochun*,et al.*hebei university,hebei,baoding 071000,china 【abstract】 objective to study the expression of androgen receptor (ar) in breast carcinoma and its clinical significance.methods flow cytometry was using to detect the concentration of ar in breast cancer. the relationship of ar to clinicopathological factors was analyzed.results the ar expression was associated with tumor size and histological grade. ar expression was higher in smaller tumors(≤2cm) than in bigger tumors(p=0.000). higher in tumors with low histological grade than those with high histological grade(p=0.000). ar was related to er(r=0.347，p=0.000).conclusion ar is related to low malignancy in breast cancer， it may be a new prognosis marker to breast cancer. 【key words】 breast carcinoma; androgen receptor; flow cytometry 乳腺癌是一种激素依赖性肿瘤，多数研究认为其发病率的增加与雌激素有关[1]，而关于雌激素受体(er)和孕激素受体(pr)的研究也显示，er、pr是乳腺癌的独立预后因子[2]，针对它们的治疗也已经成为乳腺癌的一线内分泌治疗方案[3]。Www.11665.CoM然而女性乳腺癌的发病率显示绝经后女性亦是高发年龄段，而此时女性体内雌激素大量减少，因此除了雌激素，还可能有其他因素导致乳腺癌的发生。雄激素在一些研究中显示是绝经后女性乳腺癌发病的高发因素，且雄激素大多通过雄激素受体(ar)发挥作用[4]，但目前研究结果不尽一致[5，6]。因此我们应用流式细胞术(fcm)对乳腺癌组织进行ar检测，了解ar与乳腺癌临床特点、病理指标的关系，为乳腺癌的预后判断及内分泌治疗积累资料、提供依据。 1 资料与方法 1.1 一般资料 收集河北大学附属医院普外科、肿瘤外科2009年6月至2010年3月乳腺癌确诊但，术前未行任何治疗的病例60例，年龄33～75岁，平均年龄(51±9)岁。乳腺癌手术切除标本，70%乙醇固定。其中组织学分级ⅰ级8例，ⅱ级36例，ⅲ级16例。26例乳腺癌伴腋下淋巴结转移。 1.2 方法 将固定于70%乙醇中的肿瘤组织标本经0.9氯化钠溶液冲洗后，放在150目的铜网上，下置一平皿，用眼科剪刀将组织剪碎，用眼科镊子轻搓组织，边搓边用0.9氯化钠溶液冲洗，经300目尼龙网滤除细胞团块，收集滤下的细胞悬液。1 000 r/min，离心5 min，弃上清;加入1 ml pbs将细胞悬浮计数并调整细胞浓度为1×107/ml时，此悬浮液为单分散细胞悬液。将单细胞悬液分装3管(阴性、阳性对照组及实验组)，实验组加入雄激素受体抗体100 μl，充分振摇，36℃避光反应30 min;实验组及阳性对照组各加入二抗100 μl，避光反应，然后进行fcm检测。兔抗多克隆雄激素受体抗体购自北京博奥森生物技术有限公司。 1.3 结果判定 ar经流式细胞仪检测后所得结果为具体数值，无需判定。对标本组织同时行免疫组化检测结果判定标准为：er、pr阳性表达为细胞胞核呈棕黄色颗粒，her2阳性染色位于胞膜，阳性标准为胞膜染色或胞膜、胞浆同时染色。每张切片中阳性细胞 25%或无阳性细胞为阴性，阳性细胞 25%为阳性。 1.4 统计学分析 应用spss 11.5统计软件，计量资料以±s表示多组间比较用方差分析，两组间比较采用t检验，相关分析采用直线相关和等级相关，p 0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 ar在乳腺癌中的表达 ar值最小值为291.79，最大值为512.49，平均为(361±58)。 2.2 乳腺癌组织中的ar表达与临床特点、病理参数的相关性 60例乳腺癌组织中ar的不同表达与肿瘤大小、组织学分级、tnm分期、淋巴结转移情况、月经情况、er、pr、her2比较情况见表1。我们得到以下结果：ar的表达与肿瘤大小有关联，肿瘤≤2 cm者，雄激素受体表达较高(427±42)，与2～5 cm肿瘤及﹥5 cm肿瘤(343±32，314±29)相比差别有统计学意义(p=0.000);其表达与组织学分级有关联，组织学分级ⅰ级者雄激素受体表达值较高(447±50)，与ⅱ、ⅲ级者(357±31，322±38)相比差异有统计学意义(p=0.000)。与er蛋白表达呈正相关(r=0.347，p=0.000)。与tnm分期、绝经与否，pr、her2及淋巴结转移情况不相关(p 0.05)。表1 ar表达与乳腺癌临床特点、病理指标的关系 3 讨论 ar属于核受体超家族成员，主要存在于靶细胞的核内。人ar基因定位于x染色体长臂(xq11～12)，含有8个外显子和7个内含子，全长约90 kb，编码918个氨基酸。ar有4个功能结构域，分别是低保守的氨基端结构域、高保守的dna结合结构域、铰链区与高保守的羧基端配体结合结构域，不同的结构域有不同的功能[7]。ar调节转录活化主要是通过氨基端和羧基端两个结构域来完成的。 本研究发现，ar表达与肿瘤大小、组织学分级呈负相关。即肿瘤越小、组织学分级越低，ar的表达越高，我们的研究结果与ogawa等[8，9]的研究一致。ogawa等[8]应用免疫组化法检测227例原发性乳腺癌中ar的表达，发现越小的肿瘤ar阳性率越高(p=0.045)，monifar等[9]应用抗ar单克隆抗体对乳腺癌标本进行检测发现ar在ⅰ级的肿瘤表达为88%，在ⅱ级和ⅲ级的肿瘤中分别为71%和47%。表明ar的高表达可能预示肿瘤恶性程度较低。 我们的研究还发现，ar的表达与er的阳性表达率呈正相关，即er阳性者ar的表达高，与文献报道相似[8,9]。ogawa等[8]研究发现ar与er表达相关(p=0.027)。monifar等[9]的研究表明：90%分化ⅰ级的侵袭性癌与55%分化ⅱ级的侵袭性癌表现为er+/ar+，而绝大多数分化ⅲ级的侵袭性癌表现为er/ar。因为目前一般认为er的表达是预后良好与否的指标，即er阳性者预后较好，而ar的表达又与er呈正相关，所以ar的高表达也可能预示着预后良好。国外文献已有相关报道[4，10] 。agrawal等[10]研究表明ar阳性者5年内的局部复发率为22.6%(48/212)，阴性者的局部复发率为52.2% (144/276)。在所有局部复发患者中，ar阳性者所占比率为25%，明显低于ar阴性者(占75%)，差异有统计学意义(p=0.023)。shippinger等[4]的研究也有相似发现，即ar阳性患者复发后的平均生存时间(21.89个月)高于ar阴性患者(11.99月)。我们的研究还需进行长期随访，才能得出预后结论。我们的研究没有发现ar与her2、pr、tnm分期、淋巴结转移情况和绝经与否有关。 【参考文献】 1 chlebowski rt，kuller lh，prentice rl，et al.breast cancer after use of estrogen plus progestin in postmenopausal women.n engl j med，2009，360：573587. 2 chevallier b，heintzmann f，mosseri v，et al.prognostic value of estrogen and progesterone receptors in operable breast cancer. results of a univariate and multivariate analysis.cancer， 1988，62：25172524. 3 gnant m，mlineritsch b，schippinger w，et al.endocrine therapy plus zoledronic acid in premenopausal breast cancer.n engl j med，2009，360：679691. 4 shippinger w，regitnig p，dandachi n，et al.evaluation of the prognostic significance of androgen receptor expression in metastatic breast cancer.virchows arch，2006，449：2430. 5 carreno g， del casar jm， corte md， et al. local recurrence after mastectomy for breast cancer：analysis of clinicopathological， biological and prognostic charactersitics. breast cancer res treat，2006，6：4348. 6 allegra jc，woodcock t，woolf s，et al.a randomized trial comparing mitoxantrone with doxorubicin in patients with stage ⅳ breast cancer. invest new drugs，1985，3：153161. 7 kumar r， johnson bh， thampson eb. overview of the structural basis for transcription regulation by nuclear hormone receptors.essays biochem，2004，40：2739. 8 ogawa y，hai e，matsumoto k，et al. androgen receptor expression in breast cancer：relationship with clinicopathological factors and biomarkers. int j clin oncol，2008，13：431435. 9 moinfar f，okcu m，tsybrovskyy o， et al. androgen receptors frequently are expressed in breast carcinomas potential relevance to new therapeutic strategies. cancer， 2003，98： 703711. 10 agrawal a k，jilen m， grzebieniak z，et al.androgen receptors as a prognostic and predictive factor in breast cancer.folia histochem cytobiol， 2008，46：269276.