内容
作者：贲永光,李康,李坤平,孔繁晟,陈健鸣
【摘要】 目的 建立以猪胆汁制的胆南星的薄层色谱鉴别方法。方法 以环己烷乙酸乙酯冰醋酸（体积比8∶8∶0.8）为展开剂，以羧甲基纤维素钠为黏合剂自制硅胶g薄层板，20％磷钼酸溶液为显色剂，进行薄层色谱分析。结果 胆南星药材和猪去氧胆酸对照品在薄层板上主斑点位置及颜色一致；且斑点集中，分离度好。结论 所建立的方法快速、简便、灵敏、重现性好、专属性强，可作为以猪胆汁制的胆南星的质量控制方法之一。
【关键词】 胆南星 猪去氧胆酸 去氧胆酸 薄层色谱
abstract:objective to establish a thin layer chromatography for analyzing the components of bile arisaema. methods cyclohexane, ethyl acetate and glacial acetic acid (8∶8∶0.8) were used as the developing solvent. samples were analyzed on a layer plate of silica gel g thin by using 20% phosphomolybdic acid as chromogenic agent. results both bile arisaema and hyodeoxycholic aicd had the same main spot and color on the plate which was separated well with other spots. conclusion the method is rapid, simple, sensitive and reproducible, which could be used for the quality control of bile arisaema.
key words:bile arisaema；hyodeoxycholic acid；deoxycholic acid；thin layer chromatography
胆南星（arisaema cum bile）具有清热化痰、息风定惊的功效，用于痰热咳嗽、咯痰黄稠、中风痰迷、癫狂惊痈等证［1］。www.11665.COM本品粉末呈淡黄棕色，薄壁细胞类圆形，充满糊化淀粉粒。草酸钙针晶束长20～90 μm，螺纹及环纹导管直径8～60 μm［1,2］。胆南星为天南星炮制品之一，系由制或生天南星细粉与牛、羊或猪胆汁经加工或发酵加工而成。胆汁制天南星，既可减低生南星的毒副作用，又使其药性由温转凉，本草认为其息风定惊有奇效。作为胆南星主要加工辅料的胆汁，现代实验药理学研究表明其具有镇静、安神、调节心血管系统作用［3,4］。胆南星的原药材为天南星，其药用物质基础研究很少，在中国药典中［5］也未有胆南星的相关薄层色谱鉴别方法。本文对胆南星进行薄层定性鉴别试验，为快速鉴别胆南星的化学成分和质量控制提供依据。
1 材料与方法 kq3200型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；p1薄层色谱展开缸（上海信宜仪器厂制造，规格100×200）；无水乙醇、乙酸乙酯、环己烷、冰醋酸、三氯甲烷、磷钼酸（分析纯，广州化学试剂厂）；硅胶g（分析纯，青岛海洋化工有限公司）；胆南星由广州市药材公司提供（批号：071102、071105、071112、071121）；去氧胆酸对照品（批号：0788910）、猪去氧胆酸对照品（批号：00879607）均购自中国药品生物制品检定所。
2 方法与结果 取本品2 g，粉碎过二号筛，加乙醇15 ml，置水浴加热回流1 h，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1 ml作为供试品溶液。取猪去氧胆酸1 mg，加甲醇制成每1 ml含1 mg的猪去氧胆酸对照品溶液。取去氧胆酸1 mg，加甲醇制成每1 ml含1 mg的去氧胆酸对照品溶液。 试验分别吸取供试品溶液与对照品溶液各2 μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶g薄层板上,以环己烷乙酸乙酯冰醋酸(体积比8∶8∶0.8)的上层溶液为展开剂,展开,取出,凉干,以20％磷钼酸溶液为显色剂，在105 ℃加热至斑点显色清晰。色谱图见图1、2。从图可见，胆南星药材的主要斑点和对照品猪去氧胆酸的主斑点在同一位置上，且斑点清晰，表明本文的胆南星样品的主要成分为猪去氧胆酸，是以猪胆汁制的。
图1 胆南星供试品与去氧胆酸对照品薄层色谱图（略）
figure 1 tlc of bile arisaema and deoxycholic aicd 图2 胆南星供试品与猪去氧胆酸对照品薄层色谱图（略） figure 2 tlc of bile arisaema and hyodeoxycholic aicd 3 讨论
3.1 样品的来源 胆南星为天南星炮制品之一，系由制或生天南星细粉与牛、羊或猪胆汁经加工或发酵加工而成。实验结果表明，本文的胆南星样品的主要成分为猪去氧胆酸，说明样品是以猪胆汁制的。
3.2 展开剂比例的选择 分别以环己烷乙酸乙酯冰醋酸(体积比8∶8∶0.8)和环己烷乙酸乙酯冰醋酸(体积比2∶8∶1.5) 的上层溶液为展开剂,比较两者的分离效果。结果表明：以环己烷乙酸乙酯冰醋酸(体积比2∶8∶1.5)为展开剂时，斑点颜色不清晰；而以环己烷乙酸乙酯冰醋酸(体积比8∶8∶0.8)为展开剂时，供试品图谱上与对照品于同一位置显相同颜色的斑点，而且斑点清晰，因此选择环己烷乙酸乙酯冰醋酸（体积比8∶8∶0.8）作为展开剂。
3.3 显色剂的选择 以环己烷乙酸乙酯冰醋酸(体积比8∶8∶0.8)为展开剂,分别以20％磷钼酸溶液和香草醛试液为显色剂。结果表明：以香草醛试液作显示剂时，斑点颜色不清晰,以20％磷钼酸溶液作显色剂时，供试品图谱在与对照品在同一位置上的斑点颜色比较清晰，所以选20％磷钼酸溶液作为显示剂。
3.4 稳定性的考察 以环己烷乙酸乙酯冰醋酸(体积比8∶8∶0.8)上层溶液为展开剂,显色剂为20％磷钼酸溶液，考察在不同温度、不同湿度下的分离效果。结果表明：在温度为30 ℃,湿度为30％的条件下，斑点清晰可见，色谱上部斑点没有接近前沿；在温度为4 ℃，湿度为30％的条件下，猪去氧胆酸对照品的主斑点偏离得比较严重，与胆南星药材溶液不能成线性关系；而在温度为4 ℃，湿度为90％的条件下，虽然主斑点成线性关系，但是斑点的清晰度不够；在温度为30 ℃，湿度为90％的条件下，主斑点比较清晰，但出现了边缘效应。因此，应控制在温度为30 ℃，湿度为30％的环境下进行薄层色谱鉴别。
【参考文献】 ［1］ 李薇，肖翔林，张丹雁.常用中药薄层色谱鉴定［m］.北京：化学工业出版社，2005：15-18. ［2］ 许海琴,许列琴,许江苇.常用天然提取物质量标准参考手册［m］.北京：化学工业出版社，2003：35-40. ［3］ 朱燕飞.主成分分析在胆南星质量控制研究的应用［j］.中国中药杂志，2005,30(14):1089-1090. ［4］ 肖学凤,陈新培.hplc法测定猪胆汁膏中猪去氧胆酸含量［j］.天津中医,2002,19(6):42-43. ［5］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部［m］.北京：化学工业出版社,2005:111-121.