内容
作者：刘明平， 吴依娜， 贺文娟
【摘要】 目的考察蛇床子有效组分皮肤用药的安全性。方法多次重复给药观察其对豚鼠完整及破损皮肤的皮肤刺激性;豚鼠多次接触受试药物观察其有无过敏反应。结果蛇床子醇提物及挥发油对豚鼠完整皮肤未见明显红斑、水肿等刺激反应，对破损皮肤出现红肿等轻度刺激反应;豚鼠多次接触醇提物及挥发油均未见红斑、水肿等皮肤过敏反应。结论蛇床子醇提物及挥发油外用无明显皮肤刺激性和致敏作用。
【关键词】 蛇床子; 皮肤毒理学
蛇床子为伞形科草本植物蛇床子cindium monnieri (l.) cusson的成熟果实。我们对其止痒的有效组分进行了筛选，结果表明其止痒有效组分为其醇提物和挥发油(另文发表)。蛇床子为治疗多种皮肤病的最常用药物之一，临床多以外用为主，在诸多治疗瘙痒症的外用复方中，蛇床子亦为主药。为此，我们对其有效组分的皮肤刺激性和过敏反应进行了研究。现报道如下。
1 材料
1.1 动物白色豚鼠90只，体重250～300 g，雌雄各半，由广东省医学实验动物中心提供，合格证号：0032425。www.11665.cOm
1.2 试剂2，4-二硝基氯苯(dncb)，上海试剂一厂生产，批号：060901。
1.3 药物蛇床子，购自广州中医药大学第一附属医院中药房，经本校中药鉴定教研室鉴定为伞形科草本植物蛇床子cindium monnieri(l.) cusson的成熟果实。蛇床子挥发油(采用水蒸馏法提取挥发油，得率为1.5%)。蛇床子醇提物(取蛇床子，加8倍量95%乙醇加热回流提取3次，2 h/次,合并滤液，浓缩，定容至1 g/ml)。氟轻松软膏，南昌立健药业有限公司生产，批号：h36022124。
2 方法与结果
2.1 蛇床子有效组分对豚鼠完整及破损皮肤的刺激性实验60只豚鼠于给药前24 h背部脊柱两侧对称选两处脱毛，面积约40 cm2，去毛后24 h检查去毛皮肤是否受伤，如受伤的皮肤不宜用于完整皮肤的刺激性实验。破损皮肤的制作系采用注射针头将去毛皮肤划破，以有渗血为度。随机分为6组，即完整皮肤醇提组，破损皮肤醇提组，完整皮肤挥发油组，破损皮肤挥发油组，完整皮肤氟轻松组，破损皮肤氟轻松组。实验采用同体左右自身对比，左侧去毛区涂擦蛇床子醇提物、挥发油各1 ml及氟轻松软膏，右侧涂擦空白溶剂，消毒纱布和胶布固定。给药24 h后，用温水去除残留药物，去除药物后24，48，72 h至第7天，观察记录涂抹处有无红斑和水肿等情况。皮肤刺激性评分标准及评价标准参照参考文献[1]进行。实验结果见表1。 刺激分值：(红斑反应总分+水肿反应总分)/动物数。
刺激分值 0.5为无刺激; 3为轻度刺激; 6为中度刺激; 6为强度刺激。
结果表明，蛇床子醇取物及挥发油对完整皮肤无刺激性，对破损皮肤有轻度刺激性，阳性药氟轻松软膏对完整皮肤有轻度刺激性，对破损皮肤有中度刺激性。
2.2 蛇床子有效组分皮肤过敏性实验将30只豚鼠随机分成3组，即蛇床子挥发油组、蛇床子醇提物组和2，4-二硝基氯苯组。表1 多次给药期间皮肤刺激性实验结果
2.2.1 致敏接触于给药前24 h在每只豚鼠背部脊柱两侧进行脱毛，面积约40 cm2。3组分别涂擦蛇床子挥发油、蛇床子醇提物和0.25%的2，4-二硝基氯苯各0.1 ml于豚鼠左侧脱毛区，用1层油纸及2层消毒纱布覆盖，以胶布固定，持续6 h，第7天和第14天以同样方法重复1次，共3次。
2.2.2 激发接触于末次给药致敏后14 d，将蛇床子挥发油组、蛇床子醇提组和0.25%的2，4-二硝基氯苯各0.1 ml分别涂于相应动物的右侧脱毛区，6 h后去掉药物，即刻观察，然后于24，48，72 h再次观察皮肤过敏反应情况，根据受试组与对照组豚鼠皮肤反应的差别，按参考文献[1]据皮肤红斑、水肿情况进行评分，并计算出各组反应平均值。按皮肤致敏性评价标准对皮肤致敏性进行评价，并计算致敏反应发生率。判断受试物过敏反应，同时观察豚鼠有否哮喘、站立不稳等全身性过敏反应。实验结果见表2。
公式：反应平均值=(红斑形成总分+水肿形成总分)/动物数
致敏反应发生率(%)=有过敏反应豚鼠数/豚鼠总数×100%表2 皮肤过敏实验结果
结果表明，各组动物精神状态、行为活动、饮食、粪便及体重变化等情况正常,亦未出现哮喘、站立不稳、休克等全身性过敏反应。激发给药后6，24，48，72 h观察：2，4-二硝基氯苯组豚鼠左侧皮肤受试区均出现轻、中度红斑，并见水肿，致敏率达100%;蛇床子醇提物及挥发油组豚鼠均未见红斑、水肿等皮肤过敏反应。
3 讨论
中药蛇床子为临床治疗皮肤病的常用药物，多以外用为主，其主要有效组分为蛇床子总香豆素(total coumarins of fructus cnidii，tcfc)及挥发油。王氏[2]综述发现外用白头翁、泽漆、毛莨、芦荟、追风草、防风、枯矾、苍耳子、没药、板蓝根、金樱子、沉香、仙人掌等能引起接触性皮炎;周氏[3]研究发现蛇床子超临界提取物外用有一定的皮肤光毒性。本研究未发现蛇床子醇提物及挥发油有明显皮肤刺激性和致敏作用，但外用中药的皮肤毒性仍需引起大家的重视。
【参考文献】 [1] 徐叔云，卞如濂，陈 修. 药理实验方法学[m].北京：人民卫生出版社，2001：229，238. [2] 王 云，李林峰，陈学荣.中药引起的不良反应概况[j].中国中西医结合杂志，2002，22(8)：635. [3] 王永辉，周 然，李艳彦，等.蛇床子超临界提取物的皮肤毒理学研究[j].中国实验方剂学杂志，2007，13(12)：38.