内容
作者：郭丽英 郭晨明, 马方婧， 迪丽米娜·伊拉木 作者单位：新疆医科大学第一附属医院乳腺小儿外科, 新疆 乌鲁木齐
【摘要】 目的：探讨雌激素受体β亚型(Estrogen Receptor，ERβ)在乳腺癌组织中的表达与雌激素受体ɑ亚型(ERɑ)、孕激素受体(PR)表达和临床病理因素的关系。方法：采用免疫组化显色系统二步法(EnVision系统)测定75例原发性乳腺癌组织中ERβ与ERα、PR的表达，并对临床诊断相关指标进行对比分析。结果：ERβ阳性表达率为53.33%(40/75)，共同表达46.66%(35/75)，ERα和ERβ共同表达，二者无相关性(P 0.05)，ERβ表达与组织学分级、腋淋巴结阳性差异有统计学意义(P 0.05);与肿瘤大小、临床分期、和病理类型无相关性(P 0.05)。结论： ERβ表达与乳腺癌高危患者密切相关，与乳腺癌的发生、发展及预后有关,可作为反映乳腺癌生物学行为的指标，不能通过ER、PR及ERα联合测定来代替ERβ的检测。
【关键词】 乳腺癌; 雌激素受体β; 雌激素受体α; 孕激素受体; 临床病理学
Clinicopathological significances of expressions of estrogen
receptor in breast carcinoma
GUO Li-Ying, GUO Chen-ming, MA Fong-jing, et al
(Department of Breast and Pediatric Surgery, First Affiliated Hospital,
Xinjiang Medical University, Urumqi 830011, China)
Abstract: Objective: To study the expression and clinical significance of estrogen receptor ER-β in breast cancer tissue. Methods: Seventy five cases of primary breast cancer were collected and detected by S-P immunohistochemical for the express of estrogen receptor ER-α, ER-β and Progestin receptor PR with En Vision system. Those data were comparasively analysed for their clinicopathological characters. Results: The ERβ positive rate was 53.33%(40/75), and 46. 66% (35/75) in which ERα was positive, too. There was no correlation with the co-expressions of ERβ and ERα . Histology grade and axillary lymph node positive showed significant difference (P 0.05). There was no correlation between tumor size, clinical stage and pathological type (P 0.05). Conclusion: It was found that ERβ expression was related with breast cancer patients in high risk. For it related to occurence, development and prognosis of breast cancer, it can be an index which reflect the biological behavior of breast cancer. The detection of ERβ can not be taken place by the combined detections of ER and ERα.
Key words: breast cancer; estrogen receptor β (ERβ); estrogen receptor α (ERα); progestin receptor (PR); clinicopathology
乳腺癌是危害女性身体健康最为常见的恶性肿瘤，其预后与多种指标相关。雌激素受体α亚型(ERα)是和乳腺癌关系最为紧密的指标，是乳腺癌内分泌治疗的金标准。但部分ERα阳性表达患者内分泌治疗后仍早期发生复发转移。近来研究发现了一种雌激素受体β亚型(ERβ)，它可能与乳腺癌发生、发展及预后有关。本研究检测75例乳腺癌患者的ERβ表达，以探讨ERβ与乳腺癌预后相关性。
1 资料与方法
1.1 临床资料 选取1999年1月～2005年新疆医科大学第一附属医院经手术治疗、病理证实且资料完整的乳腺浸润性非特殊癌的女性患者75例为研究对象。年龄45～50岁18例， 50岁57例。病程 6个月43例， 6个月32例;左乳腺35例，右乳腺39例;直径 2 cm，21例，2～5 cm 45例， 5 cm 9例;临床分期：Ⅰ期25例，Ⅱ期40例，Ⅲ～Ⅳ期10例;组织学分级：Ⅰ级24例，Ⅱ级40例，Ⅲ级11例;淋巴结阳性35例，阴性40例。
1.2 实验材料 兔抗体ERβ多克隆抗体，克隆系统AB1410(美国NOIPQNRS 公司产品);鼠抗人ERɑ单克隆抗体、克隆系1D5、鼠抗人PR单克隆抗体均购自北京中山生物技术公司。所用仪器为常规冰冻切片机，IOLYMPUSBX50显微镜。
1.3 实验方法 标本为原发性乳腺癌存档蜡块, 采用免疫组化染色方法(免疫组化PV-9000二步法)。经4%中性甲醛溶液固定,石蜡包埋,4 μm厚连续切片,常规脱蜡水化,4℃湿盒孵育过夜,加生物素标记的二抗工作液50 μl,孵育、浸洗后加辣根过氧化酶标记的卵白素工作液50 μl,37℃孵育,DAB室温下显色5~10 min,镜下监测显色过程,适时终止反应。
1.4 结果判定 ERɑ和PR阳性细胞百分数≥15%为阳性表达。ERβ阳性细胞百分数≥20%为阳性表达。
1.5 统计学处理 采用SPSS10.0软件包进行统计学分析。采用χ2检验进行率和构成比差别显著性的检验和计数资料的相关性检验，检验水准α=0.05。
2 结果
2.1 ERβ表达与乳腺癌临床病理因素的关系 45～50岁组ERβ亚型阳性表达率高于 50岁组,差异有统计学意义(P 0.05);组织学Ⅱ级高于Ⅰ级，差异有统计学意义(P 0.05);腋淋巴结转移者ERβ阳性表达率高，与腋淋巴结转移呈正相关，差异有统计学意义(P 0.05); ERβ阳性表达与病程长短、肿瘤直径、肿瘤临床分期无相关性(P 0.05)，见表1。
2.2 ERβ与ERα、PR表达的关系 75例患者ERβ阳性表达率为53.33%(40/75);ERα和ERβ共同表达46.66%(35/75)，PR阳性表达与ERβ阳性表达无相关性，ERα阳性表达与ERβ阳性表达无相关性，差异无统计学意义(P 0.05)，见表2。表1 ERβ表达与乳腺癌临床病理因素的关系表2 ERβ与ERα、PR表达的相关性
3 讨论
雌激素受体α亚型(Estrogen Receptor,ERα)基因1986年被成功克隆[1-2]，其后又发现孕激素受体(Progesterone Receptor，PR)，它们不仅有利于临床药物的选择，而且提示患者的预后，是乳腺癌内分泌治疗的金标准[3]。长期以来，人们认为只有ERα在靶组织和雌激素之间起调节作用，1998年瑞典学者Kipper等首次从大鼠前列腺和卵巢cDNA文库中克隆出的一种新的雌激素受体，命名为雌激素受体β亚型(Estrogen Receptor，ERβ)，ERβ与ERα同属雌激素受体家族成员[4]。ERβ的发现可能揭示一些以往用ERα无法解释的生物学现象，特别是乳腺癌发生、发展、激素治疗预测与激素抵抗和肿瘤预后等，因获得高特异性的ERβ多克隆及单克隆抗体较为困难[5]，ERβ蛋白水平的检测进展相对缓慢，直到2000年才始有零星的报道[6]。
3.1 ERβ在乳腺癌组织中的表达的状况 研究发现ERβ在乳腺癌中表达水平比正常乳腺组织明显降低,ERβ在乳腺癌组织中的表达约50%左右，一般低于ERα表达水平。尽管乳腺癌组织中ERα表达占优势，但在不表达ERα乳腺癌中ERβ有高表达趋势。本组ERβ阳性表达率为53.33%(40/75)，与文献报道一致。
3.2 ERβ在乳腺癌组织中与ERα、PR相关性 大部分乳腺癌组织中ERα和ERβ共同表达，而且ERα的细胞数目或比例高于ERβ,Roger等[7]报道乳腺癌组织中可有50%组织共同表达ERα和ERβmRNA。另有文献报道乳腺癌组织中ERα和ERβmRNA的表达无关，ERβmRNA的表达较 ERαmRNA少得多，ERαmRNA在ER阳性组织中表达较ER阴性组织中高，而ERβmRNA则相反[8-11]。本实验资料显示ERα阳性表达82.67%(62/75)，ERβ阳性表达53.33%(40/75)，ERα和ERβ共同表达46.66%(35/75)，与文献报道一致;在乳腺浸润性非特殊癌ERα阳性表达与ERβ阳性表达差异无统计学意义(P 0.05)。提示：在乳腺癌组织中ERβ蛋白的表达低于ERα,ERα与ERβ共同表达，二者可能不具有相关性。
Dotzlaw等[1]应用乳腺浸润性导管癌标本研究ERβmRNA表达和配体结合法检测PR状态的关系，在PR阴性肿瘤组织中，ERβ表达显著高于PR阳性组(P=0.036)，认为ERβ表达水平能被孕激素所抑制，乳腺癌PR状态可以影响ERβ的表达。PR阳性通常表示乳腺癌较好的预后和内分泌治疗有效，ERβ表达和PR的相反关系提示ERβ的过度表达可能与较差预后有关。本实验结果显示PR阳性表达77.33%(58/75)，免疫组化法PR阳性表达与ERβ阳性表达不具有相关性。故PR与ERβ表达的相关性还有待进一步的研究。
3.3 ERβ在乳腺癌组织内表达与临床病理意义 Speirs等[5]测定乳腺组织中ERβ和ERα共同表达同肿瘤分级有关。温险峰等[10]用Western bolt法检测86例乳腺癌标本中ERβ蛋白含量，发现表达水平和病理分级相关(P 0.05)。本组资料提示，组织学Ⅱ级高于Ⅰ级，差异有统计学意义(P 0.05)，提示组织学分化越差，则ERβ阳性表达越高，与文献报道结果一致。Ⅲ级无明显差异，可能与例数少有关。但ERβ和ERα共同表达有增高趋势，提示ERβ过度表达与乳腺癌的预后不良有关。Speirs等[5]研究表明ERβ组中淋巴结阳性比例升高。本组腋淋巴结阳性者ERβ表达为80%(28/35)，显著增高(P 0.05)。ERβ阳性表达与腋淋巴结转移呈正相关，提示肿瘤生长快、组织分化差和浸润性强。Saunders等[8]的研究对年龄段未进行比较，而在所有年龄段对绝经前后进行比较，ERβ的表达无差异。本组ERβ亚型阳性表达率45～50岁组高于 50岁组，提示在中年人群中ERβ表达高，预后欠佳，故应重视术后化疗、放疗、内分泌和基因等综合治疗。本组资料显示ERβ表达与病程、肿瘤直径、临床分期间无相关关系，考虑本研究为回顾性研究且病例数较少，因此需要对前瞻性随机对照研究的结果进一步验证。
综上所述，ERβ在乳腺癌组织中有表达，在ERα阳性乳腺癌的内分泌治疗中, ERβ表达可能影响治疗效果, ERβ和ERα与临床病理因素关系的差异说明ERβ在乳腺癌中可能具有独特的作用。关于ERβ对乳腺癌的预后意义还需要进一步研究来证实。
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