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芦荟对糖尿病神经及肾脏并发症防治作用的动物实验研究
内容
作者：刘文 作者单位：261041山东潍坊职业学院医疗服务中心
【摘要】 目的：应用动物实验研究芦荟对糖尿病慢性并发症（DCC）的防治作用。方法：四氧嘧啶诱发糖尿病鼠，随机分为治疗、对照二组，治疗组给予芦荟灌胃给药0.4ml/日,对照组给予生理盐水。实验第4、8、12、16周各测定血糖和尿蛋白1次，第16周时处死大鼠，剥离双侧坐骨神经，测定其传导速度，取肾脏病理切片PAS染色用于观察病理变化。结果：糖尿病鼠应用芦荟治疗后血糖明显下降，尿蛋白显著低于对照组；肾病理切片PAS染色发现对照组肾小球结构紊乱，基底膜增厚，PAS阳性物质大量沉着于毛细血管之间，而治疗组上述病理变化显著减轻。结论：芦荟对糖尿病鼠神经传导速度及肾脏病变的改善有明显效果，使用芦荟防治DCC是有效的途径。
【关键词】 糖尿病慢性并发症 芦荟
资料与方法
实验动物：正常雄性SD大鼠，体重250～300g。
四氧嘧啶糖尿病鼠实验模型制备：将空腹SD大鼠腹腔注射5%四氧嘧啶生理盐水注射液，剂量100mg/kg，72小时后断尾测血糖值，血糖＞11.0mmol/L者占70%，其余30%＜11.0mmol/L。再给予补充注射半量四氧嘧啶，3天后测血糖＞11.0mmol/L者达到100%。随机分为两组进行实验，包括芦荟治疗组和生理盐水对照组，各组间血糖差异≤1mmol/L，另设正常对照组。
实验方法：坐骨神经传导速度的测定：于实验16周时用20%乌拉坦（氨基甲酸乙脂），每千克体重5ml麻醉大鼠，将背部及后肢毛剪去，切开皮肤，仔细分离双侧坐骨神经，分离过程中注意用甘油保护坐骨神经，分离动作须轻、细，以免损伤神经，剪去坐骨神经分支须用玻璃分针将坐骨神经轻轻拉起，勿用镊子钳；分离坐骨神经应尽量长。上至骶椎旁，下至足跟部，使分离出的神经长达5～6cm，分离后立即测定，用生理盐水为导电介质，用JL-B电刺激器产生兴奋刺激，然后用SR-46型二线示波器测定神经传导速度。②肾脏组织病理学观察：大鼠处死后取出肾脏，置canoy固定液中固定后制成蜡块，切片厚度4～6μm，以PAS法染色，在普通光镜下观察其病理形态改变。
实验经过：本实验用20只雄性Sprang-Dawley大鼠，由本院动物实验室喂养，上海饲料厂提供鼠育成颗粒饲料，大鼠自由进食，所有大鼠生活环境相同。分出 5只为正常对照，其余用四氧嘧啶诱发糖尿病，造型过程经过1周，其中5只死亡，剩余10只造型成功，血糖值＞11.0mmol/L，随机分为两组：糖尿病组，糖尿病芦荟治疗组，见表1。表1 实验设计（略）
实验为期16周。芦荟治疗组采用中国芦荟新鲜叶汁，避光冷藏保存。给药方法：糖尿病＋芦荟治疗组灌胃给药0.4ml/日，糖尿病组灌生理盐水0.4ml/日。实验开始第4、8、12、16周各测定血糖和尿蛋白1次，第16周时先将大鼠麻醉，剥离双侧坐骨神经，分别测定其传导速度，取均值，然后断头取血测定血糖，剪开腹腔，取肾脏，置canoy固定液中供PAS染色用。其他检测：血糖测定用葡萄糖氧化酶法，尿蛋白测定用考马斯亮兰法。
统计学分析：计量资料值以均数±标准差表示，各配伍组样本均数比较，采用方差分析。
结果
血糖变化，见表2。表2 血糖变化（略）
坐骨神经传导速度，见表3。表3 对照组治疗组坐骨神经传导速度（略）
从表3中可以看出，糖尿病坐骨神经传导速度明显低于正常（P＜0.01），使用芦荟治疗可明显改善传导速度（P＜0.01）。
尿蛋白含量的变化：糖尿病鼠于4、8、12、16周末测定尿蛋白的变化，见表4。
从表4中看出，随病程进展，糖尿病组尿蛋白有上升趋势，用芦荟治疗后尿蛋白基本维持不变，但未治疗的糖尿病组尿蛋白明显升高，远高于治疗组水平（P＜0.01）。
肾小球病理形态光镜检查：糖尿病鼠肾小球基底膜明显增厚，系膜基质增多（表现为 PAS染色阳性物质沉积），治疗的糖尿病鼠上述改变轻微，但与正常肾脏相比仍有一定程度的系膜基质增多。PAS染色阳性物沉着于内皮细胞下。
讨 论
芦荟的主要作用有：①降血糖作用；②具有清除氧自由基、抗氧化损伤的作用；③对非特异性免疫、体液免疫、细胞免疫均有明显调节作用，对干扰素系统有明显刺激作用；④抗癌作用；⑤其他作用，如抗炎、抗病毒、抗辐射、增强肾上腺皮质功能、升高白细胞等［1］。DDC的发病机制尚不十分清楚，一般认为高血糖是其始动环节，高血糖导致的非酶糖化损伤、氧化应激损伤可能是DCC发生、发展的重要病理机制，芦荟对DCC的防治作用可能与其降血糖、清除氧自由基、抗氧化损伤的作用有关，但确切机制有待今后进一步研究证明。
本组结果显示，糖尿病鼠应用芦荟治疗后血糖明显下降；糖尿病组随着病程的延长，尿蛋白逐渐上升，使用芦荟糖尿病鼠尿蛋白显著低于糖尿病组；肾病理切片PAS染色显示糖尿病鼠肾小球结构紊乱，基底膜增厚，PAS阳性物质大量沉着于毛细血管之间，而治疗的大鼠上述病理变化显著减轻；糖尿病神经病变的公认指标——坐骨神经传导速度提高。
【参考文献】
1 肖志艳,陈迪华,斯建勇,等.库拉索芦荟的化学成分的研究.药学学报,2000,35(2):120-123.
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